Polysciences是一家化学品制造公司，在国际上享有盛誉。可提供各种生命科学、生物加工、微粒子、医疗器械、特种化学品和电子化学品等领域的产品和定制解决方案。Polysciences的产品不仅效率高，而且稳定可靠，为广大科研人员提供了坚实的技术支撑。

Polysciences提供从科研级到GMP级转染试剂，可用于基因转染、蛋白表达和RNA干扰等研究方向。Polysciences科研级转染试剂有两种分子量，分别是Polyethylenimine, Linear, MW 25000(即PEI 25K)和Transfection Grade Linear Polyethylenimine Hydrochloride，MW 40,000(即PEI MAX)。

一、Polysciences PEI转染试剂的优势

·转染效率高，细胞毒性低；

·蛋白表达量高；

·节约成本：PEI至少能够降低40%的转染试剂总成本；

·适用于HEK293等真核细胞的转染；

·适用于贴壁细胞和悬浮细胞的转染；

·适用于有血清和无血清的转染条件；

·无机试剂，无动物源成分；

·产品稳定，质控严格；

·工艺流程适用范围广，容易优化，适合小规模培养板、培养瓶到大规模的生物反应器。

二、Polysciences PEI转染试剂使用方法

以293T贴壁细胞为例：

1.细胞准备：

使用胶原酶处理细胞并计数。在6孔板中以每孔2×10⁶细胞接种，置于37℃，5%CO₂培养箱培养24h。24h后，移除之前培养基，每孔加入2mL新鲜的DMEM：F12+5%FBS。

2.转染过程：

(1)检查细胞汇合度，达到70%-80%时开始转染。

(2)分别用两份100µL无血清培养基稀释DNA，使DNA终浓度为1ug/ml（DNA/总培养体积）和适当比例的Polysciences PEI转染试剂。DNA:PEI 的比例要依据自己实验摸索最适比例。

(3)将稀释的Polysciences PEI转染试剂与质粒（总体积 200µL）轻轻混匀，室温孵育30分钟。

(4)PEI-DNA复合物滴加到细胞培养板每个孔中，轻摇混匀。注意轻轻沿着孔板边缘滴入，不是在细胞的顶部以免破坏细胞的粘附性。

(5)将培养板放入 37℃，5%CO2培养箱培养中培养24h。

3.结果观察：

在24小时后使用荧光显微镜观察转染效果，超过80%的293T细胞在转染后的24h可以观察到绿色荧光。

三、使用时的注意事项：

1.对于不同的细胞培养条件，需要做出相应的优化。

2.转染过程中要小心细胞的受损和污染问题。

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