一、基本信息                                                             

产品编号：RR910

检测方法：实时荧光PCR (Real Time PCR)，双标记探针法 (TaqMan探针法)

检测靶标：基于牛线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基I (COX I) 基因的种间多态性差异

检测物种：可特异性检测黄牛 (Bos taurus)、水牛 (Bubalus bubalis) 和牦牛 (Bos grunniens) 的源性成分

规格：25 μl反应 × 50次

荧光通道：FAM通道：检测牛源性成分 (Bovine) 

                  HEX通道：检测内参照 (Internal Control)

保存条件：-20℃

适用仪器：广泛应用于主流实时荧光PCR仪，包括Thermal Cycler Dice系列、Applied Biosystems QuantStudio系列、Roche LightCycler系列、Bio-Rad CFX96、Gentier 96E/96R、SLAN-96P、LineGene9600等。

二、产品应用                                                             

本试剂盒用于快速、特异、灵敏地鉴别和检测样品中是否含有牛源性成分。其主要应用领域包括：

△ 食品安全监测：检测肉制品、奶制品、保健品等食品中是否掺有或混有牛源性成分，用于真伪鉴别和溯源。

△ 化妆品原料溯源：检测化妆品中宣称的牛源性成分（如胎盘素、胶原蛋白等）的真实性。

△ 饲料安全控制：检测饲料中是否含有非法添加的牛源性成分，预防同类相食和疾病传播风险。

△ 科研与法医鉴定：用于物种鉴定、成分分析和科学研究。

△ 重要提示：经验证，对鸭、猪、白尾鹿等物种在10 ng基因组DNA添加量下无检出或Ct值>35，特异性良好。但对于未经验证的物种，可能存在交叉风险。

三、产品优势                                                             

✅ 高特异性与灵敏度：针对牛线粒体COX I基因设计，特异性强，灵敏度高，可有效区分牛与其他常见动物物种。

✅ 内标监控，防止假阴性：内置Internal Control (HEX通道)，可监控PCR反应过程是否正常，有效避免因样品中存在抑制物或操作失误导致的假阴性结果。

✅ 快速高效：采用Hot Start Taq酶，有效抑制非特异性扩增。预混体系操作简便，整个PCR过程仅需约1.5小时。

✅ 即用型预混液：提供2X Premix，已将酶、buffer、dNTP等预混好，只需加入引物探针混合物和模板即可，减少了操作步骤和污染风险。

✅ 合规性与可靠性：该试剂盒（原Code No. D318）为《SN/T 2051-2008 食品、化妆品和饲料中牛羊猪源性成分检测方法 实时PCR法》附录B所述试剂盒，方法可靠，结果权威。

✅ 广泛仪器兼容性：兼容市场上绝大多数主流实时荧光PCR仪器，适用性广。

四、使用说明（实验操作概要）                                                  

1. 反应体系配制（于冰上操作）：2X Premix for Bovine: 12.5 μl；Primer Mix for Bovine: 1 μl；Probe Mix for Bovine (避光): 1 μl；模板DNA: 1 μl (阴性对照用水替代，阳性对照用提供的Control DNA替代)；无菌水: 加至总体积25 μl。

2. PCR反应程序（以两步法为例）：预变性: 95℃ for 10秒

                                                          PCR反应（40个循环）：95℃ for 5秒

                                                                                                  60℃ for 30秒 (在此阶段采集FAM和HEX荧光信号)

    结果分析：运行结束后，仪器软件会自动生成扩增曲线和Ct值，根据“结果判定”规则进行分析。

五、注意事项                                                             

1. 严格分区操作：为防止污染，实验必须在三个独立区域进行：①反应液配制区、②样品DNA制备区、③模板添加及PCR扩增/检测区。

2. 防污染措施：使用无核酸酶的枪头、离心管；操作时穿戴手套；试剂开封前请短暂离心。

3. 探针避光：Probe Mix含有荧光探针，必须避光保存，配制反应液时也应避免强光照射。

4. 试剂解冻：试剂完全解冻后，应轻轻颠倒混匀，避免产生气泡，并短暂离心后使用。

5. 质量控制：每次实验必须同时设置阴性对照（以水代模板） 和阳性对照（用试剂盒提供的Control DNA），以监控实验的有效性。

6. 模板质量：推荐使用高质量的DNA提取试剂盒（如TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0）制备模板DNA，以确保提取效率并去除PCR抑制物。

六、结果判定                                                             

 七、相关产品推荐                                                          

1. 其他物种检测试剂盒：Real Time PCR Ovine DNA Detection Kit (绵羊, RR911)

                                        Real Time PCR Porcine DNA Detection Kit (猪, RR912)

                                        Real Time PCR Chicken DNA Detection Kit (鸡, RR916)

                                        Real Time PCR Duck DNA Detection Kit (鸭, RR934)

                                        Real Time PCR Mammalian DNA Detection Kit (哺乳动物, RR915)

2. DNA提取试剂盒：TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0 (Code No. 9765)：通用型基因组DNA提取试剂盒。

                                  DNA Isolation Reagent for Meat and Meat Products (Code No. 9178)：专为肉制品DNA提取设计。

3. 多功能检测试剂盒：Real Time PCR Bovine and Ovine DNA Detection Kit (牛和绵羊, RR913)