一、基本信息

产品编号：T1300（不含酚红）/T1320（含酚红）

规格：100mL，10*100mL

保存温度：-20℃保存

产品描述：本产品为胰蛋白酶-EDTA消化液，包含0.25%胰蛋白酶和0.02% EDTA（0.53 mM），溶解于无钙镁离子的平衡盐溶液中，并经过滤除菌处理，可直接用于贴壁细胞和组织的消化分散。产品提供含酚红（T1320）与不含酚红（T1300）两种规格，酚红可作为pH指示剂。

二、产品应用

胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)主要用于贴壁细胞的消化分散，以制备单细胞悬液。

△贴壁细胞传代：用于常规细胞培养中贴壁细胞的消化与收获，以便进行传代或实验。

△原代细胞分离：用于从组织中消化分离获得原代细胞，进行体外培养。

△细胞实验制备：为流式细胞术、细胞计数、细胞接种等后续实验提供细胞悬液。

三、产品优势

✅即用型配方：溶液经过滤除菌，无需自行配制与灭菌，开瓶即可使用，操作简便。

✅协同消化作用：胰蛋白酶与EDTA联用，能更有效地水解细胞间连接蛋白，提高消化效率。

✅细胞活性保护：优化的酶浓度与作用时间，有助于在消化后保持细胞良好的活力与状态。

✅规格选择灵活：提供含酚红与不含酚红两种规格，可适应不同实验体系对pH指示剂的需求。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 洗涤：吸弃原培养液，使用无菌PBS、Hanks平衡盐溶液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残留血清。

2. 加液：向培养器皿中加入适量消化液，确保液体能覆盖细胞层。

3. 孵育：室温静置孵育1-2分钟，实际时间需根据细胞类型和贴壁强度进行优化。

4. 观察：在显微镜下观察细胞形态，当细胞变圆、间隙增大或轻拍培养皿侧壁可见细胞脱落时，视为消化适度。

5. 终止：吸除消化液，立即加入含血清的完全培养液以终止胰蛋白酶活性。

6. 重悬：用培养液轻柔吹打细胞层，使细胞完全脱落并分散均匀，形成单细胞悬液。

五、注意事项

1. 时间优化：消化时间因细胞类型而异，需通过预实验确定最佳时间，避免消化过度损伤细胞。

2. 无菌操作：本品不含防腐剂，使用时应严格遵循无菌操作规程，防止微生物污染。

3. 储存条件：建议-20℃避光保存，避免反复冻融。为方便使用，可根据实验需求进行小剂量分装。

4. 使用范围：本品仅供科研使用，不可用于临床诊断、治疗或食品、化妆品生产。

5. 安全防护：操作时请穿戴实验服、手套及口罩，确保实验人员安全。

6. 残留处理：消化后可通过离心去除含酶的消化液，并用新鲜培养液重悬细胞，以减少酶对细胞的持续作用。

六、相关产品推荐

1. 无酚红胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)（货号：T1300）：适用于对酚红敏感或需要避免pH指示剂干扰的细胞培养与消化实验。

2. 细胞培养级PBS缓冲液（货号：P1020）：用于细胞培养过程中的洗涤步骤，为细胞提供等渗的离子环境。

3. 胎牛血清（货号：S9020）：用于配制完全培养液，为细胞生长提供必需营养并有效终止胰蛋白酶消化反应。

4. 通用细胞冻存液（货号：24800）：用于消化收获后的细胞进行长期低温保存，确保细胞复苏后的活性。