一、基本信息
产品名称:全蛋白提取试剂盒(强)
产品货号:BC3710
规格:50T/100T
保存温度:裂解液(强)于2-8℃保存;磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂、PMSF于-20℃保存。
二、产品介绍
本试剂盒专为从哺乳动物组织或细胞中高效提取总蛋白而设计。其核心裂解液作用强烈,并预配置了蛋白酶与磷酸酶抑制剂,能快速裂解样本并有效抑制蛋白降解,适用于免疫印迹(Western Blot)等基础蛋白研究。请注意,由于含有酶抑制剂,本产品不适用于蛋白激酶或磷酸激酶活性研究。
三、产品应用
全蛋白提取试剂盒(强)主要用于从哺乳动物样本中快速获取总蛋白,适用于多种下游分析。
△免疫印迹分析:为Western Blot实验提供高质量的总蛋白样品。
△蛋白定量分析:提取的蛋白可用于BCA法、Bradford法等蛋白浓度测定。
△组织蛋白研究:适用于多种动物组织样本的总蛋白提取。
△细胞蛋白研究:适用于贴壁或悬浮培养细胞的总蛋白提取。
四、产品优势
✅高效裂解:强效裂解液能快速破坏细胞及组织结构,释放总蛋白。
✅抑制降解:预配的蛋白酶和磷酸酶抑制剂可最大程度减少蛋白降解与去磷酸化。
✅操作便捷:优化的一体化配方,简化了实验前的抑制剂配制步骤。
✅兼容性强:提取的蛋白兼容多种下游应用,如电泳和免疫检测。
✅低温保护:所有组分均需低温保存与操作,保障蛋白提取过程的稳定性。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 工作液配制:于预冷的裂解液中按比例加入磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂及PMSF,混匀后置于冰上备用。
2. 样本处理:对于组织样本,需剪碎后加入工作液进行冰上匀浆;对于细胞样本,需用预冷PBS洗涤后加入工作液。
3. 冰上裂解:将样本与工作液充分混合,在低温环境下进行充分裂解。
4. 离心分离:于4℃条件下,以12000g离心力离心30分钟,沉淀细胞碎片。
5. 上清收集:小心吸取离心后的上清液,即为提取的总蛋白溶液。
6. 分装保存:将蛋白上清分装后,建议于-80℃超低温冰箱保存,避免反复冻融。
六、注意事项
1. 低温操作:整个提取过程需在冰上或4℃环境下进行,所有试剂需预冷,以防止蛋白降解。
2. 抑制剂现配:PMSF等抑制剂在水溶液中不稳定,应现用现加至裂解液中,以保证抑制效果。
3. 避免污染:操作过程中需使用洁净的耗材,避免引入外源性蛋白酶污染。
4. 分装冻存:提取后的蛋白样品应进行小份分装,并于-80℃保存,以最大程度保持蛋白活性与稳定性。
5. 应用限制:本产品因含有磷酸酶抑制剂,不适用于需要研究蛋白质磷酸化状态或激酶活性的实验。
七、相关产品推荐
1. BCA蛋白浓度测定试剂盒(货号:PC0020)
2. 高效RIPA裂解液(组织/细胞)(货号:R0010)
3. PMSF(100mM)(货号:P0100)
4. 磷酸酶抑制剂混合物(货号:P1260)
5. 彩虹180广谱蛋白Marker(11-180KD)(货号:PR1910)