一、基本信息

英文名称：D-Val-Leu-Lys-pNA dihydrochloride

中文名称：D-缬氨酸-亮氨酸-赖氨酸-对硝基苯胺二盐酸盐

产品货号：HY-131409

保存温度：粉末状态建议-80°C保存2年，-20°C保存1年；溶解后-80°C可保存6个月，-20°C可保存1个月（均需在氮气保护、避湿条件下储存）

产品别名：D-Val-Leu-Lys-p-nitroanilide dihydrochloride

CAS号：62354-43-2

分子式：C23H40Cl2N6O5

外观(性状)：白色至类白色粉末

纯度：≥95% (HPLC)

二、产品介绍

D-Val-Leu-Lys-pNA dihydrochloride是一种基于生色原理设计的合成肽底物。其结构末端连接对硝基苯胺（pNA）发色团，在特定蛋白酶催化水解后释放pNA，可在405 nm波长下通过吸光度变化进行检测。该产品是纤溶酶/纤溶酶原的经典特征性底物，也可用于其他具有相似底物特异性的丝氨酸蛋白酶的活性研究。

三、产品应用

本产品主要用于基于生色底物法的蛋白酶活性测定与酶动力学研究。

△纤溶酶活性检测：作为纤溶酶及其前体纤溶酶原的特征性底物，用于测定其水解活性。

△丝氨酸蛋白酶底物筛选：适用于枯草芽孢杆菌来源的DFE27等丝氨酸蛋白酶的底物特异性与活性评估。

△细菌蛋白酶研究：可用于研究如牙龈卟啉单胞菌赖氨酸牙龈蛋白酶等细菌蛋白酶的酶学性质。

△酶动力学参数测定：通过监测反应初速度，可用于计算酶的Km、Vmax等动力学常数。

四、产品优势

✅高特异性：其氨基酸序列（D-Val-Leu-Lys）设计针对纤溶酶类蛋白酶，具有较高的底物特异性。

✅灵敏检测：水解后释放的对硝基苯胺（pNA）在405 nm处有强吸收，便于通过分光光度法进行灵敏、定量的比色检测。

✅应用广泛：除纤溶酶外，也被证实可作为多种微生物来源丝氨酸蛋白酶的有效研究工具。

✅稳定性好：在推荐的干燥、低温及惰性气体保护条件下，产品具有较长的储存期限。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 溶液配制：根据实验所需浓度，使用超纯水或DMSO溶解粉末，建议超声助溶以配制储备液。

2. 分装保存：将配制好的储备液进行小体积分装，避免反复冻融，并按照推荐条件（-80°C或-20°C，氮气保护）储存。

3. 反应体系建立：将适当稀释的酶液与含有底物的缓冲液在适宜温度（如37°C）下混合，启动酶促反应。

4. 连续监测：使用酶标仪或分光光度计，在405 nm波长处连续监测反应体系吸光度随时间的变化。

5. 数据分析：根据pNA的摩尔消光系数，将吸光度变化值转换为底物水解速率，从而计算酶活性或动力学参数。

六、注意事项

1. 储存条件：本品对湿气和温度敏感，粉末及溶液均需严格在干燥、低温及惰性气氛下保存，以维持稳定性。

2. 溶液使用：储备液溶解后应尽快分装并使用，避免反复冻融导致底物降解或失效。

3. 实验对照：进行酶活测定时，需设置不含酶的空白对照以及可能的不含底物的背景对照，以确保数据准确性。

4. 安全操作：本品为化学试剂，操作时应佩戴适当的个人防护装备，并在生物安全柜或通风橱内进行。