一、基本信息

产品名称：Zombie NIR™ Fixable Viability Kit可固定活性检测试剂盒

产品货号：423105/423106

规格：100次检测，500次检测

保存温度：-20°C

二、产品介绍

Zombie NIR™ 可固定活性检测试剂盒是一种基于胺反应性荧光染料的细胞活性鉴定工具。该染料为极性水溶性分子，对活细胞膜不通透，但可进入膜结构受损的死细胞或凋亡细胞，并与胞内氨基共价结合。其激发波长为633 nm，最大发射峰位于746 nm近红外区，产生的红光荧光信号适用于多色流式检测，尤其适合在复杂多色面板中区分细胞死活状态。

三、产品应用

Zombie NIR™ 可固定活性检测试剂盒主要用于通过流式细胞术区分哺乳动物细胞的活细胞与死细胞/膜受损细胞。其具体应用包括：

△流式细胞术分析：用于多色流式细胞术实验中的细胞活性鉴定。

△免疫学研究：在免疫细胞分型、功能分析等实验中排除死细胞干扰。

△肿瘤学研究：用于评估肿瘤细胞或免疫细胞在实验处理后的活性状态。

△神经科学研究：用于原代神经元或其他神经细胞活性分析。

△细胞凋亡检测：作为辅助指标，指示细胞膜完整性丧失。

四、产品优势

✅ 近红外发射：发射波长位于近红外区（746 nm），易于与常用可见光区荧光素搭配，减少光谱重叠，优化多色面板设计。

✅ 可固定性：染料与细胞内氨基共价结合，染色后细胞经固定和破膜处理，荧光信号仍能稳定保留，便于进行胞内染色。

✅ 水溶性：极性水溶性染料，有助于减少非特异性背景染色，提高信噪比。

✅ 广泛适用性：适用于多种哺乳动物细胞类型的活性检测，包括原代细胞和细胞系。

✅ 灵活染色：提供标准染色与免洗顺序染色两种方案，可根据实验流程灵活选择。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 试剂准备：使用前将试剂盒平衡至室温，向每管冻干染料中加入100 µL无水DMSO，充分混匀以复溶染料。

2. 细胞洗涤：用不含Tris和蛋白质的PBS缓冲液洗涤细胞。

3. 染料稀释：将复溶后的母液按1:100至1:1000的比例在PBS中稀释，工作浓度需根据细胞类型和数量进行优化滴定。

4. 细胞染色：将（1-10）x 10^6个细胞重悬于100 µL稀释好的染料工作液中。

5. 避光孵育：在室温或4°C下，避光孵育15-30分钟。

6. 终止染色：加入含血清或BSA的细胞染色缓冲液洗涤一次，以去除未结合染料。

7. 后续处理：可根据实验需求，继续进行细胞表面或胞内抗体染色，或选择直接上机分析。

六、注意事项

1. 存储条件：未开封试剂盒需在-20°C干燥保存。复溶后的染料应立即使用，或分装保存于-20°C干燥避光环境（建议置于干燥器中），并于一个月内用完。

2. 优化滴定：不同细胞类型因大小和死亡程度不同，染色差异较大，建议对染料用量和细胞数量进行预实验优化，以降低活细胞背景染色。

3. 缓冲液选择：细胞洗涤与染料稀释需使用不含Tris和蛋白质的PBS，以避免游离氨基干扰染色反应。

4. 光谱考虑：该染料最大发射峰为746 nm，光谱特性与APC/Cyanine7类似，设计多色面板时需注意滤光片优化和荧光补偿。

5. 用途限定：本产品仅限用于科学研究，不可用于临床诊断或治疗。

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