一、基本信息
产品名称:Cell Activation Cocktail(含布雷菲德菌素A)
产品货号:423303 / 423304
规格:100 µL / 400 µL (4 x 100 µL)
保存温度:-70°C避光保存
二、产品介绍
Cell Activation Cocktail(含布雷菲德菌素A)为一种预混合的细胞活化试剂,包含优化浓度的PMA(佛波酯)、离子霉素以及蛋白质转运抑制剂布雷菲德菌素A。通过PMA和离子霉素激活细胞诱导细胞因子产生,同时布雷菲德菌素A可抑制细胞内蛋白质转运,使分泌性细胞因子在细胞内累积,从而便于通过流式细胞术等方法进行胞内检测。
三、产品应用
Cell Activation Cocktail (with Brefeldin A) 主要用于研究免疫细胞活化和细胞因子产生。具体应用包括:
△T细胞活化:用于多克隆激活T细胞,诱导细胞因子表达。
△胞内细胞因子检测:通过抑制蛋白转运,实现对IFN-γ、TNF-α等细胞因子的流式细胞术分析。
△免疫细胞功能研究:评估各类免疫细胞在活化状态下的功能与信号通路。
四、产品优势
✅即用型配方:预先优化配比的PMA、离子霉素和布雷菲德菌素A混合液,简化实验流程,确保结果一致性。
✅高效捕获:布雷菲德菌素A有效阻断高尔基体运输,使分泌性细胞因子在胞内滞留,提高检测灵敏度。
✅广泛适用:适用于多种类型的细胞活化实验,包括人外周血淋巴细胞等。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 细胞准备:将目标细胞重悬于培养基中,推荐细胞密度为1-2 x 10^6 cells/mL。
2. 试剂解冻:将试剂管置于37°C水浴中完全融化。
3. 添加试剂:按每毫升细胞悬液加入2 µL Cocktail的比例进行添加。
4. 细胞孵育:将细胞置于37°C、5% CO2培养箱中孵育6小时或所需时间。
5. 细胞收集:孵育结束后,以350g离心5分钟收集细胞,弃去上清。
6. 洗涤细胞:向细胞沉淀中加入细胞染色缓冲液,重悬后以350g离心5分钟,弃上清。
7. 重复洗涤:再次重复步骤6的洗涤过程。
8. 后续检测:处理后的细胞可用于表面标志物或目标蛋白的检测。
六、注意事项
1. 孵育时间:不建议使用含布雷菲德菌素A的本品进行超过12小时的过夜孵育,以避免潜在的细胞毒性。如需长时间刺激,建议选用不含布雷菲德菌素A的活化试剂。
2. 储存条件:本品对温度敏感,需严格在-70°C下避光保存,并避免反复冻融。
3. 用途限定:本品仅限用于科学研究,不适用于临床诊断或治疗。
七、相关产品推荐
1. Cell Activation Cocktail (without Brefeldin A)(货号:423301)
2. Monensin Solution (1,000X)(货号:420701)
3. Cell Staining Buffer(货号:420201)