一、基本信息
产品名称:Lipofectamine® 2000 转染试剂
产品货号:11668030/11668027/11668019/11668500
规格:0.3 mL、0.75 mL、1.5 mL、15 mL
产品组分:专有阳离子脂质体配方
递送分子类型:质粒DNA、siRNA、mRNA
细胞类型:广泛适用于多种真核细胞系
二、产品概述
Lipofectamine® 2000 转染试剂是一种经过优化的阳离子脂质体试剂,专为高效、便捷地将多种核酸分子导入真核细胞而设计。其配方能够与带负电的核酸分子自发形成稳定的复合物,通过膜融合机制促进细胞摄取,适用于多种细胞类型的瞬时转染实验。
三、产品应用
△基因功能研究:用于将表达目的基因的质粒DNA转染入细胞,以研究基因的过表达效应。
△RNA干扰实验:适用于将siRNA递送至细胞内,实现特定基因的敲低,用于功能缺失性研究。
△mRNA转染:可用于将体外转录的mRNA直接导入细胞,实现快速、瞬时的蛋白表达。
△共转染实验:支持将质粒DNA与siRNA在同一反应体系中同时转染入细胞,用于复杂的基因调控研究。
四、产品优势与特点
✅高效转染:专有脂质体配方能有效包裹核酸,并在多种细胞系中实现高转染效率。
✅操作简便:转染后无需移除复合物或更换培养基,简化了实验流程。
✅应用广泛:兼容质粒DNA、siRNA和mRNA等多种核酸类型,满足不同的研究需求。
✅快速便捷:复合物制备时间短,仅需室温孵育5分钟即可用于转染。
五、使用说明(概述)
1. 细胞铺板:在转染前一天进行细胞铺板,确保转染时细胞融合度达到70-90%。
2. 试剂稀释:使用Opti-MEM®低血清培养基分别稀释质粒DNA和Lipofectamine® 2000试剂。
3. 复合物制备:将稀释后的DNA与稀释后的转染试剂以1:1体积比混合,轻柔混匀。
4. 孵育复合物:将混合液在室温下静置孵育5分钟,以形成DNA-脂质体复合物。
5. 添加复合物:将孵育好的DNA-脂质体复合物直接滴加至细胞培养孔中,轻柔摇匀。
6. 培养与分析:将细胞放回37°C培养箱继续培养1-3天后,进行后续检测与分析。
六、注意事项
1. 储存条件:本品需于4°C避光保存,请勿冷冻。
2. 用量优化:转染试剂的理想用量因细胞类型和传代次数而异,建议对新细胞系进行浓度梯度测试以确定最佳条件。
3. 核酸质量:使用高纯度、无菌的质粒DNA(推荐浓度0.5-5 μg/μL)对于获得高转染效率至关重要。
4. 培养基选择:制备复合物时务必使用Opti-MEM®等无血清培养基,血清会干扰复合物形成。
5. 用途限定:本产品仅限用于科学研究,不适用于临床诊断程序。
七、相关产品推荐
1. Lipofectamine® 3000 转染试剂(货号:L3000015)
2. Lipofectamine® RNAiMAX 转染试剂(货号:13778150)
3. Lipofectamine™ LTX 试剂与 PLUS™ 试剂(货号:15338100)
4. Lipofectamine™ 干细胞转染试剂(货号:STEM00001)