一、基本信息

产品编号：RR047Q/RR047A/RR047B

产品规格：10 Rxns/100 Rxns/100 Rxns×4

产品描述：本产品是一款专为实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应设计的试剂盒，其核心在于整合了高效的gDNA Eraser酶，可在反转录前快速去除总RNA中残留的基因组DNA污染，从而确保基因表达定量分析结果的准确性。该试剂盒提供优化的反应体系，能够高效合成适用于染料法和探针法qPCR的cDNA模板。

二、产品应用

本产品主要用于需要高精度基因表达分析的Real Time RT-PCR实验。

△基因表达定量分析：为染料法或探针法qPCR提供高纯度cDNA模板。

△基因组DNA污染去除：快速消除总RNA样品中gDNA对定量结果的干扰。

△标准曲线建立：配合专用稀释液，可准确定量并建立宽广范围的标准曲线。

△高通量筛选：适用于需要快速、准确进行大量样品基因表达检测的研究。

三、产品优势

✅高效去基因组：内置gDNA Eraser酶，可在2分钟内有效去除基因组DNA，无需额外DNase I处理及纯化步骤。

✅快速反转录：经过优化的反应体系，仅需15分钟即可高效完成cDNA合成。

✅广谱反转录：采用Oligo dT与Random 6 mers混合引物，可均衡地反转录包括无Poly(A)尾RNA在内的各类转录本。

✅灵活兼容：提供分别针对染料法和探针法qPCR优化的反转录体系，用户可根据下游检测方法灵活选择。

✅准确定量：附带专用核酸稳定稀释液，有助于在低浓度下准确定量模板，建立线性范围更广、更可靠的标准曲线。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 体系配制：在冰上按反应数配制去除基因组DNA反应的预混液，然后加入总RNA样品。

2. 基因组去除：将反应体系于42℃孵育2分钟，以消除基因组DNA污染。

3. 反转预混：在冰上配制反转录反应预混液。

4. 反转录反应：将预混液加入已完成基因组去除的反应液中，于37℃孵育15分钟。

5. 酶失活：将反应体系于85℃加热5秒，以灭活反转录酶。

6. 产物保存：反应完成后，可将cDNA产物置于4℃短期保存或-20℃长期保存备用。

五、注意事项

1. 体系兼容性：推荐与特定的TB Green Premix系列产品联用以获得最佳结果；与TB Green Fast qPCR Mix联用可能性能不佳。

2. 预混液配制：建议预先配制Master Mix以减少操作误差和试剂损失。

3. 酶液取用：取用高浓度甘油保存的酶液时需缓慢吸取，避免因粘附导致体积不准。

4. 缓冲液混匀：使用前需振荡并离心混匀5×gDNA Eraser Buffer和5×PrimeScript Buffer 2，确保溶液均一。

5. 防污染操作：分装不同样品时务必更换无菌枪头，防止交叉污染。

6. RNA投入量：需注意下游检测方法对总RNA最大投入量的限制。

六、相关产品推荐

1. TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (货号：RR820Q/A/B)：适用于染料法qPCR检测，与本试剂盒合成的cDNA兼容性佳。

2. TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (货号：RR420A/B)：经典的染料法qPCR预混液，适用于基因表达定量分析。

3. Probe qPCR Mix (货号：RR391S/A/B)：适用于探针法qPCR检测，可进行高特异性靶标定量。