一、基本信息

产品名称：Gibco™ B-27™ Supplement (50X)

产品货号：17504044/17504001

保存条件：-20°C至-5°C避光保存

有效期：自生产之日起12个月

产品描述：本品为50X浓缩液，是一种无血清添加剂，旨在支持多种中枢神经系统神经元的生长与存活。其核心特点为：无血清、支持神经元纯化培养、含抗氧化剂、与Neurobasal™培养基配套使用。

二、产品应用

Gibco™ B-27™ Supplement (50X) 主要用于中枢神经系统神经元的体外培养研究。

△胚胎及胎鼠神经元培养：与Neurobasal™培养基配合，用于培养胚胎期及胎鼠来源的神经元。

△成体及出生后神经元培养：与Neurobasal™-A培养基配合，用于培养出生后及成体脑组织来源的神经元。

△神经元来源的肿瘤细胞系培养：补充至Neurobasal™培养基中，可用于培养神经元来源的肿瘤细胞系。

△EGF反应性神经前体细胞扩增：与DMEM/F-12培养基及GlutaMAX™添加剂配合，支持大鼠胚胎纹状体及中脑来源的EGF反应性前体细胞的扩增。

三、产品优势

✅成分明确：作为无血清添加剂，提供成分明确的培养环境，减少批次间差异。

✅支持高纯度神经元培养：配合专用培养基，可在无需星形胶质细胞滋养层的条件下，实现近乎纯净的神经元培养。

✅抗氧化保护：配方中包含抗氧化剂，有助于减少培养过程中活性氧对神经元的损伤。

✅应用广泛：适用于从胚胎到成体、从原代细胞到细胞系等多种中枢神经系统神经元模型的培养。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 解冻：将B-27™ Supplement (50X)置于4°C冰箱中过夜解冻。

2. 配制完全培养基：使用前，按2%的体积比将本品添加至Neurobasal™或Neurobasal™-A基础培养基中，并补充0.5 mM的GlutaMAX™添加剂。

3. 包被培养器皿：使用Poly-D-Lysine对细胞培养板或培养皿进行包被处理。

4. 接种细胞：将细胞以建议密度（如160 cells/mm²）重悬于预热的完全培养基中，接种至已包被的器皿。

5. 培养与维持：将培养物置于36-38°C、5% CO₂的湿润培养箱中培养，并根据神经元类型（如海马与非海马神经元）定期更换培养基。

五、注意事项

1. 储存条件：必须避光保存于-20°C，避免反复冻融以维持组分活性。

2. 无菌操作：本品经无菌工艺处理，但在配制完全培养基时，仍需在无菌条件下进行操作。

3. 解冻方式：推荐于4°C缓慢解冻，请勿在37°C水浴中快速解冻，以防组分降解。

4. 培养基配伍：本品专为与Neurobasal™系列培养基配伍设计，用于其他基础培养基时需验证效果。

5. 细胞类型特异性：针对海马神经元等特定细胞类型，培养基换液时需注意避免添加L-谷氨酸。

六、相关产品推荐

1. Neurobasal™ Medium（货号：21103049）：与B-27™ Supplement配伍，用于胚胎及胎鼠神经元培养的基础培养基。

2. Neurobasal™-A Medium（货号：10888022）：与B-27™ Supplement配伍，用于出生后及成体神经元培养的优化培养基。

3. GlutaMAX™ Supplement (100X)（货号：35050061）：提供稳定二肽形式的谷氨酰胺，用于配制完全神经元培养基。

4. Poly-D-Lysine（货号：A3890401）：用于培养器皿的包被，以促进神经元贴壁。

5. Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red（货号：25200072）：用于细胞传代时消化贴壁细胞。