一、基本信息
产品名称:TrypLE™ Express 酶 (1X)
产品货号:12605010/12605028/12605036/12604013/12604021/12604039
规格:100mL,500mL,20×100mL
保存温度:15°C至30°C室温避光保存。
二、产品介绍
TrypLE™ Express是一种重组胰蛋白酶样蛋白酶,作为无动物来源的细胞消化酶,专为替代传统的猪或牛源胰蛋白酶而设计,提供含酚红与不含酚红版本。该产品在Dulbecco‘s磷酸盐缓冲液(DPBS)与1 mM EDTA的溶液中配制,具有室温稳定性,能够高效解离贴壁依赖型细胞系,适用于含血清及无血清培养系统。
三、产品应用
TrypLE™ Express主要用于贴壁细胞的消化解离。
△细胞传代:用于常规贴壁细胞系的消化和传代培养。
△原代细胞分离:适用于从组织分离原代细胞。
△细胞收获:用于细胞实验(如流式分析、蛋白提取)前的细胞收集。
△无血清培养系统:兼容化学成分明确的无血清培养基环境。
四、产品优势
✅无动物源性:采用重组技术生产,避免引入动物源病原体风险,降低外源因子污染。
✅使用便捷:室温储存稳定,即取即用,无需复杂的预处理或解冻步骤。
✅高特异性:纯度高于天然胰蛋白酶制剂,切割特异性更强,主要作用于赖氨酸和精氨酸的C端肽键。
✅无需灭活:仅通过稀释即可终止酶活,简化操作流程,无需额外添加胰蛋白酶抑制剂。
✅广泛兼容性:已验证可用于多种含血清及无血清培养体系中的细胞解离。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 预热:将TrypLE™ Express和完全培养基预热至37°C。
2. 洗涤:吸弃旧培养基,使用不含钙、镁的DPBS缓冲液洗涤细胞单层。
3. 加酶:加入适量TrypLE™ Express,确保液体完全覆盖细胞层。
4. 孵育:将培养器皿置于37°C孵育,直至细胞在显微镜下观察完全变圆、脱落。
5. 中和:加入预热的完全培养基以稀释并终止酶反应,轻柔吹打形成单细胞悬液。
6. 离心:收集细胞悬液,以约100 × g的离心力离心5-10分钟。
7. 重悬:弃去上清,用新鲜完全培养基重悬细胞沉淀。
8. 计数:使用合适的细胞计数方法(如自动细胞计数器)测定细胞密度与活力。
六、注意事项
1. 安全操作:使用前请查阅安全数据表(SDS),并佩戴适当的个人防护装备。
2. 储存条件:产品需避光保存于15-30°C,开封后请注意无菌操作。
3. 适用性:本产品仅限用于科学研究,不适用于诊断程序。
4. 抑制剂使用:不建议使用大豆胰蛋白酶抑制剂来中和本产品。
5. 细胞类型:对于特定敏感细胞系,建议在正式实验前进行消化条件优化。
七、相关产品推荐
1. Dulbecco‘s磷酸盐缓冲液,不含钙和镁(货号:14190136)
2. 胰蛋白酶-EDTA (0.05%),含酚红(货号:25300054)
3. UltraPure™ 0.5 M EDTA,pH8.0(货号:15575020)
4. TrypLE™ Select CTS™(货号:A1285901)