一、基本信息
产品名称:IV型胶原酶,粉末
产品货号:17104019
规格:1 g
保存温度:2°C to 8°C
二、产品介绍
本系列胶原酶产品源自溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),专为细胞与组织解离设计。作为蛋白酶,其特异性作用于胶原蛋白中Pro-X-Gly-Pro序列的X-甘氨酸键,能有效降解天然三股螺旋胶原纤维。粗制胶原酶制剂含有多种蛋白酶、多糖酶和脂肪酶,可协同水解细胞外基质中的多种成分,是组织解离的理想选择。根据对不同组织解离效能的差异,产品分为I、II、IV等多种类型。
三、产品应用
本系列胶原酶产品主要用于多种组织来源的原代细胞分离。
△组织特异性解离:Type IV型适用于胰岛组织(胰岛素受体位点)的分离。
四、产品优势
✅特异性强:特异性水解胶原蛋白的Pro-X-Gly-Pro序列,能有效降解天然胶原纤维,对细胞损伤相对较小。
✅复合酶系:粗制制剂包含多种水解酶,可协同作用,全面消化细胞外基质中的蛋白质、多糖和脂质。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 酶液配制:向胶原酶干粉中加入含钙镁的HBSS,涡旋溶解,定容至100 U/μL(1000X),过滤除菌后分装冻存。
2. 组织处理:将组织块修剪至3-4 mm大小,用含钙镁的HBSS清洗数次。
3. 酶解消化:向浸没组织的HBSS中加入胶原酶至终浓度50–200 U/mL,于37°C孵育4–18小时,振荡及添加3 mM CaCl₂可提高效率。
4. 细胞分离:将消化物通过无菌细胞筛网以分散细胞,未充分解离的组织可加入新鲜酶液继续消化。
5. 细胞清洗:离心收集细胞,用不含胶原酶的HBSS清洗数次。
6. 细胞计数与培养:用完全培养基重悬细胞,计数后接种至合适的培养器皿中。
六、注意事项
1. 用途限制:本产品仅限用于科学研究,不适用于诊断程序。
2. 安全操作:操作时需佩戴适当的个人防护装备,避免吸入或皮肤接触,使用前请查阅安全数据表。
3. 储存条件:冻存酶液应避免反复冻融,使用前于冰上解冻,并注意避光保存。
4. 批次差异:粗制胶原酶存在批次间活性差异,可能偶有细胞毒性,建议进行预实验优化条件。
5. 钙离子依赖:消化过程中补充适量钙离子(如3 mM CaCl₂)有助于维持并提升胶原酶活性。
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