一、基本信息

产品名称：II 型胶原酶，粉末

产品货号：17101-015

规格：1 g

保存温度：2°C 至 8°C

二、产品介绍

II 型胶原酶专为细胞和组织解离而设计。作为一种蛋白酶，其特异性识别并切割胶原蛋白中脯氨酸-X-甘氨酸-脯氨酸序列内的肽键，能有效降解天然三股螺旋胶原蛋白纤维。本产品为粗制酶制剂，除胶原蛋白酶外，还含有多种其他水解酶，协同作用于细胞外基质中的多种成分，从而实现高效的组织解离。

三、产品应用

本胶原蛋白酶系列产品主要用于原代细胞分离与组织解离研究，具体应用包括：

△组织特异性解离：Type II 型适用于心脏、甲状腺、唾液腺、肝脏、骨及软骨组织。

四、产品优势

✅特异性：能够特异性识别并降解天然胶原蛋白，这是许多其他蛋白酶不具备的功能。

✅高效性：粗制酶制剂含多种水解酶，可协同水解细胞外基质中的蛋白质、多糖和脂质。

✅活性定义明确：酶活性单位定义清晰，便于实验标准化和重复。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 酶液配制：向胶原蛋白酶冻干粉中加入含钙镁的HBSS缓冲液，涡旋溶解，配制为100 U/μL的储存液。

2. 过滤分装：使用低蛋白吸附滤器对储存液进行过滤除菌，随后分装并避光保存于-20°C至-5°C。

3. 组织处理：将目标组织用无菌器械剪切成小块，并用含钙镁的HBSS缓冲液清洗。

4. 酶解孵育：将组织块浸没于含有50–200 U/mL胶原蛋白酶的工作液中，于37°C孵育4至18小时。

5. 细胞分离：将消化后的混合物通过无菌细胞筛网以分离分散的细胞，未完全消化的组织可加入新鲜酶液继续消化。

6. 细胞清洗：通过离心用不含酶的HBSS缓冲液清洗分散的细胞数次。

7. 重悬计数：用完全培养基重悬细胞沉淀，并使用合适的细胞计数方法测定活细胞密度。

8. 接种培养：将细胞接种至含有适宜培养基的培养器皿中。

六、注意事项

1. 用途限定：本品仅限用于科学研究，不适用于诊断程序。

2. 安全操作：操作时需穿戴适当的个人防护装备，避免吸入或皮肤接触，使用前请查阅安全数据表。

3. 储存条件：解冻后的酶液或工作液应置于冰上，避免反复冻融，长期储存需避光。

4. 条件优化：针对不同组织，酶解浓度、时间及是否添加氯化钙等条件需进行预实验优化。

5. 批次差异：粗制胶原蛋白酶存在批次间活性差异，建议针对关键实验进行批次验证。

七、相关产品推荐

1. HBSS缓冲液，含钙、镁，不含酚红（货号：14025）

2. 台盼蓝染色液（货号：15250）

3. Countess™ 细胞计数腔室载玻片（货号：C10228）