一、基本信息

产品名称：PowerUp™ SYBR™ Green Master Mix

产品货号：A25741 / A25742 / A25743 / A25776 / A25777 / A25778 / A25779 / A25780 / A25918

规格：1 mL/ 5 mL/ 50 mL/ 2 × 5 mL/ 5 × 5 mL/ 10 × 5 mL/ 2 × 1 mL/ 5 × 1 mL/ 10 × 1 mL

保存温度：2–8°C避光保存

二、产品介绍

PowerUp™ SYBR™ Green Master Mix是一种预混的2X浓度通用型实时荧光定量PCR反应混合液，旨在为科研应用提供卓越的分析特异性和灵敏度。该预混液包含SYBR™ Green染料、具有双热启动修饰的Dual-Lock™ DNA聚合酶、热敏尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)、ROX™被动参考染料、含dUTP/dTTP的dNTP混合物以及优化的缓冲液组分，用户仅需加入引物、模板和水即可进行反应。

三、产品应用

PowerUp™ SYBR™ Green Master Mix适用于基于SYBR™ Green染料法的实时荧光定量PCR实验。

△基因表达分析：通过cDNA模板进行相对定量，研究基因表达水平变化。

△病原体检测：利用gDNA模板对特定病原体核酸进行定性或绝对定量检测。

△基因分型：通过熔解曲线分析，区分具有单核苷酸多态性或不同序列长度的PCR产物。

△拷贝数变异分析：对基因组DNA中的特定基因拷贝数进行绝对或相对定量。

四、产品优势

✅高特异性：采用独特的Dual-Lock™热启动DNA聚合酶，通过双重化学修饰有效抑制低温下的非特异性扩增，确保反应特异性。

✅高灵敏度：优化的反应体系与高性能聚合酶相结合，能够检测低丰度模板，提供宽广的线性检测范围。

✅防污染：预混液中包含热敏UDG酶，可有效降解含尿嘧啶的既往扩增产物，防止PCR交叉污染。

✅通用兼容性：配方中包含ROX™被动参考染料，可兼容多种主流实时荧光定量PCR仪，校正孔间荧光信号波动。

✅便捷易用：提供即用型2X预混液，简化实验流程，减少移液步骤和操作误差，提升实验重复性。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 试剂准备：轻轻涡旋混匀PowerUp™ SYBR™ Green Master Mix；将DNA模板和引物置于冰上解冻，涡旋混匀后短暂离心。

2. 反应体系配制：根据反应数量（建议额外配制10%的富余量）计算各组分用量，在预混管中依次加入预混液、引物、模板及无核酸酶水。

3. 混合分装：将反应体系充分混匀并短暂离心以去除气泡，随后将混合液分装至光学反应板或管的各孔中。

4. 封板离心：使用光学封板膜密封反应板，并短暂离心以确保所有液体汇集于管底。

5. 上机运行：将反应板置于实时荧光定量PCR仪中，根据仪器型号及引物Tm值设置相应的热循环程序并启动运行。

6. 数据分析：运行结束后，使用仪器软件分析扩增曲线，计算Ct值，通过熔解曲线评估扩增特异性，并进行相对或绝对定量分析。

六、注意事项

1. 储存条件：本品需在2–8°C条件下避光保存，以维持各组分活性。

2. 模板质量：建议每反应使用1–10 ng单链cDNA或10–100 ng基因组DNA，模板纯度与完整性直接影响实验结果。

3. 引物设计：遵循实时定量PCR引物设计通用原则，建议进行引物浓度优化以获得最佳扩增效率。

4. 防污染操作：实验操作应在洁净区域进行，使用带滤芯的吸头，并定期使用UDG酶处理以控制气溶胶污染。

5. 光学兼容性：确保使用光学透明的反应板或管及相应的封板膜，以避免荧光信号采集受到干扰。

6. 安全规范：本品仅限于科研用途，操作时应遵循实验室化学品安全及生物危害防护通用准则。

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