一、基本信息

产品名称：一步法TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒（绿色，FITC）

产品货号：E-CK-A320

规格：20Assays，50Assays，100Assays

保存温度：-20℃避光保存

二、产品介绍

本试剂盒基于TUNEL（TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling）技术原理，用于检测组织或细胞样本中的晚期凋亡细胞。该技术通过末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）将荧光标记的dUTP特异性连接到凋亡细胞DNA断裂产生的3'-OH末端，从而实现对凋亡细胞的原位标记，结果可直接通过荧光显微镜观察。

三、产品应用

本一步法TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒适用于多种样本的细胞凋亡检测。

△样本兼容性：适用于石蜡切片、冰冻切片、细胞涂片及细胞爬片等多种样本类型。

△检测目标：特异性标记晚期凋亡细胞中DNA断裂产生的3'-OH末端。

△结果观测：通过荧光显微镜直接观察荧光信号，实现原位检测。

四、产品优势

✅高灵敏度：采用优化的反应体系，能够有效标记凋亡过程中产生的微量DNA片段，检测灵敏度高。

✅操作简便：一步法标记反应，简化了实验流程，缩短了操作时间。

✅样本兼容广：试剂盒经过优化，可兼容常规的石蜡切片、冰冻切片及细胞样本。

✅结果直观：荧光标记信号可直接在显微镜下观察，便于进行定性及半定量分析。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 样本准备：根据样本类型（石蜡切片、冰冻切片或细胞样本）进行脱蜡、复水、固定及通透处理。

2. 试剂平衡：在样本上滴加TdT Equilibration Buffer，室温孵育，为标记反应创造适宜条件。

3. 标记反应：弃去平衡液，直接滴加预先混合好的TdT酶与标记液工作液，于37℃避光孵育。

4. 终止洗涤：加入终止缓冲液终止反应，并用PBS充分洗涤样本，去除未结合的标记物。

5. 复染封片：使用DAPI染液对细胞核进行复染，随后使用含抗淬灭剂的封片液封片。

6. 镜检分析：在荧光显微镜下观察，凋亡细胞核呈现特定的荧光信号。

六、注意事项

1. 保存条件：Labeling Solution和DAPI Reagent必须-20℃避光保存，避免反复冻融。

2. 样本处理：实验全程需保持样本湿润，防止干燥导致非特异性背景或信号丢失。

3. 试剂配制：TdT酶与标记液工作液需现用现配，避免剧烈涡旋混匀，轻柔吹打即可。

4. 洗涤步骤：各步骤间的洗涤必须充分，特别是蛋白酶K处理后，以避免残留物影响酶活性。

5. 条件优化：对于不同的组织或细胞样本，建议通过预实验对通透时间、酶反应时间等条件进行优化。

6. 实验对照：建议设置阳性对照（使用试剂盒内DNase I处理）和阴性对照（不加TdT酶），以确认实验体系的有效性。

七、相关产品推荐

1. 细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-FITC/PI法）（货号：E-CK-A211）

2. 活性氧（ROS）检测试剂盒（货号：E-BC-K138）

3. 线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1法）（货号：E-CK-A301）