一、基本信息
产品名称:氧消耗率(OCR)荧光法测试盒(增强型)
产品货号:E-BC-F070
产品规格:48T/96T
保存温度:2-8°C避光保存
二、产品介绍
本产品是一种基于荧光探针法的体外检测试剂盒,专用于定量测定活细胞的氧消耗率(OCR)。其原理是利用对氧气敏感的荧光探针,在封闭体系中,探针荧光强度与氧浓度呈负相关,通过监测荧光信号随时间的变化,可精确计算出细胞的实时耗氧速率,是评估线粒体呼吸功能与细胞能量代谢状态的重要工具。
三、产品应用
本氧消耗率(OCR)荧光法测试盒主要用于细胞能量代谢与线粒体功能研究。
△线粒体功能评估:检测基础呼吸与最大呼吸能力。
△药物筛选:评估化合物对细胞能量代谢的影响。
△代谢研究:探究不同生理或病理状态下细胞的耗氧特征。
△细胞应激反应分析:监测氧化应激等条件下线粒体功能的变化。
四、产品优势
✅灵敏度高:采用增强型荧光探针,对微环境氧分压变化响应灵敏,检测下限低。
✅操作便捷:提供预制的黑色透底检测板与密封液,简化了反应体系构建步骤。
✅实时监测:支持动力学模式连续检测,可获取时间依赖性的OCR变化曲线。
✅适用性广:优化后的方案兼容贴壁细胞与悬浮细胞等多种样本类型。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 细胞铺板:将细胞以适宜密度接种于黑色透底培养板,置于培养箱中过夜贴壁(贴壁细胞);或用工作液重悬细胞后直接加入板中(悬浮细胞)。
2. 探针加载:吸弃旧培养基(贴壁细胞),向各孔加入预混的工作液,于37°C孵育30分钟。
3. 加药与密封:向指定孔中加入药物或溶剂对照,立即向每孔加入密封液以封闭反应体系。
4. 荧光检测:将培养板置于预热的荧光酶标仪中,设置激发波长405 nm,发射波长650 nm,采用底部读数、动力学模式,每间隔2分钟检测一次,持续至少90分钟。
5. 数据分析:选取荧光值与时间呈线性关系的区间,根据公式OCR = (F2 - F1) / ΔT 计算氧消耗率。
六、注意事项
1. 温度控制:检测前需将所有试剂及酶标仪预热至37°C,以维持细胞活性与酶促反应稳定。
2. 探针处理:试剂一及工作液为混悬液,易沉降,使用前必须充分混匀以确保浓度均一。
3. 体系密封:加入密封液后应避免晃动培养板,以防破坏液封层导致氧气交换,影响结果准确性。
4. 工作液稳定性:配制好的探针工作液应在8小时内使用,避免探针活性衰减。
5. 细胞密度:最佳细胞接种密度需通过预实验确定,以确保荧光信号处于线性检测范围内。
6. 仪器校准:使用前请确认荧光酶标仪的滤光片设置与温控功能正常。
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