一、基本信息                                                             

产品编号：D4036（50次预处理）/D4019（100次预处理）/D4020（400次预处理）/D4037（800次预处理）

核心特点：超快速、免离心、超纯

产品描述：Zyppy™ 质粒小提试剂盒是一款质粒DNA提取试剂盒，其特点是采用了免离心的改良碱裂解系统，省去了传统质粒制备方法中常见的细胞离心收集和重悬步骤。您只需将独特配方的 7X 裂解缓冲液 直接加入细菌培养液中，中和后，即可利用 Zymo-Spin 柱技术进行纯化。此外，试剂盒中包含的专利有色缓冲液便于直观地观察细胞裂解和中和反应是否完全。Zyppy™ 质粒小提试剂盒是从大肠杆菌中高效分离质粒DNA最快、最简便的方法。所获得的质粒DNA具有高质量、无内毒素的特点，非常适用于转染、细菌转化、限制性内切酶消化、DNA连接、PCR、体外转录、测序以及其他各种敏感的下游应用。

二、产品应用                                                             

本试剂盒专为从大肠杆菌（E. coli）培养物中快速提取高纯度质粒DNA而设计。纯化得到的质粒DNA适用于各种高敏感度的下游应用，包括但不限于：

△ 转化 (Bacterial Transformation)

△ 限制性内切酶消化 (Restriction Endonuclease Digestion)

△ DNA连接 (DNA Ligation)

△ PCR

△ 体外转录 (In Vitro Transcription)

△ 测序 (Sequencing)

△ 细胞转染 (Transfection) - 经内毒素去除步骤，适合转染大多数细胞系。

三、产品优势                                                             

✅ 极致快速：从细菌培养液到获得纯化DNA仅需约8分钟，是目前市场上最快的方案之一。

✅ 革命性免离心步骤：独特的直接裂解方案，无需离心收集菌体和重悬步骤。只需将独特的7X Lysis Buffer直接加入细菌培养液中即可开始操作，极大简化了流程，节省了时间。

✅ 卓越的纯度与质量：纯化的DNA典型A260/A280比值 ≥ 1.8。包含专用的Endo-Wash Buffer步骤，可有效去除内毒素（≤ 50 EU/µg DNA），使其可直接用于转染实验。DNA可直接用于所有敏感的下游应用。

✅ 可视化操作：试剂盒中包含专利的有色缓冲液（蓝色裂解液、黄色中和液），便于用户直观地确认细胞裂解和中和反应是否完全，减少操作失误。

✅ 高产量：每次制备最多可提取25 µg的质粒DNA（实际产量取决于质粒拷贝数、培养条件和菌株）。

✅ 广泛兼容性：可提取大小高达25 kb的质粒（但对于更大的BAC/PAC构建体，建议使用Zymo的专用试剂盒）。

四、使用说明（实验流程概要）                                                  

1. 取样：取600 µl过夜培养的细菌培养液加入离心管中。

    注意：若使用富含成分的培养基（如TB、2xYT），需先离心弃去上清，用无菌水或TE缓冲液重悬菌体后再进行下一步。

2. 裂解：加入7X Lysis Buffer (Blue)，轻轻上下颠倒混匀，直至溶液变成透明蓝色，表示裂解完全。

3. 中和：加入Neutralization Buffer (Yellow)，轻轻颠倒混匀。此时溶液应变黄色，并出现白色絮状沉淀。

4. 结合：将中和后的裂解液（含沉淀）全部转移至Zymo-Spin IIN Column中，置于Collection Tube内。≥10,000 x g离心1分钟，弃滤液。

5. 洗涤：向柱子中加入400 µl Endo-Wash Buffer，离心1分钟，弃滤液。

               向柱子中加入700 µl Zyppy Wash Buffer（使用前需按说明用乙醇稀释），离心1分钟，弃滤液。

               重复加入400 µl Zyppy Wash Buffer，离心2分钟，以彻底去除乙醇。

6. 洗脱：将柱子转移至一个新的洁净的1.5 ml离心管中，向柱子基质中央加入30-100 µl Zyppy Elution Buffer（或无菌水），室温静置1分钟后，离心1分钟洗脱DNA。设备要求：微型离心机和/或真空抽滤装置。

五、注意事项                                                             

1. 储存条件：室温保存。Wash Buffer浓缩液按说明加入乙醇稀释后，应于室温保存。

2. 试剂替代：如果Zyppy Wash Buffer用完，可用80%乙醇、其他试剂盒的DNA Wash Buffer或Plasmid Wash Buffer临时替代。

3. 适用范围：本试剂盒适用于常规质粒提取，不适用于提取大型构建体（如BAC、PAC），请选用Zymo Research的ZR BAC DNA Miniprep Kit或ZymoPURE II系列试剂盒。

4. 菌体处理：对于在富含成分的培养基中生长的菌液，务必先离心并用水或TE重悬，以避免杂质干扰纯化效率。

5. 安全警告：本品为科研用途，不可用于诊断或治疗目的。操作时请遵守实验室安全规程。

六、相关产品推荐                                                           

1. Zymo Research提供了一系列高效的核酸纯化产品，可与本试剂盒配套使用或满足其他需求：

2. DNA/RNA Shield (货号: R1100-50)：一种通用的核酸稳定液，用于保护任何生物样本中的DNA和RNA，便于样本储存和运输。

3. DNA/RNA Shield SafeCollect Swab Collection Kit (货号: R1160)：包含拭子和稳定液的采样套装，用于稳定采样拭子中的核酸。

4. ZR BAC DNA Miniprep Kit：专为分离大型质粒、BAC、PAC DNA设计。

5. ZymoPURE II Plasmid Midiprep / Maxiprep Kit：适用于从中量到大量培养物中提取超低内毒素、转染级质粒DNA。