Coriell作为人类基因组计划生物资源保藏和维护机构,致力于为个性化医疗和干细胞生物学快速发展做出贡献。其中人类基因组DNA标准品,已被国内多家知名基因公司及科研单位所信赖。Coriell人类基因组DNA标准品(NA12878)已成为国内基因组测序行业的标准。
1.DNA是如何提取的?
DNA是通过Miller盐析法或磁珠纯化法提取的。
2.如何进行DNA质量控制?
·DNA浓度可通过A260处的分光光度吸光度法测定,根据惯例1 O.D.相当于50 μg/ml双链DNA,或通过Qubit dsDNA BR法(一种基于染料的荧光法)测定,具体取决于存储库。至少读取两次样本以验证读数。
·DNA完整性通过使用Agilent TapeStation进行评估。TapeStation软件确定DNA完整性数(DlN)作为gDNA完整性的衡量标准。
·使用多重PCR检测6个常染色体微卫星标记来确认DNA样本来源。
·根据所有质量控制程序,DNA样本的验收标准如下:
样本的260/280比率大于或等于1.65且小于2.1。
样本供体的身份已确认。
DNA必须完整、分子量高,并且由Agilent TapeStation检测的DIN评分≥7.0。
3. DNA溶解在什么中?
DNA溶解在TE缓冲液中(10 mM TRIS pH 8.0、1 mM EDTA,pH 8.0)。
4.一瓶DNA含量是多少?
一瓶DNA含量由储存库决定,定量方法也因储存库而异。请参阅第8条了解具体信息。DNA含量包含在每个产品的目录页中。
5.DNA样本的浓度和体积是多少?
Coriell运送的大多数样本浓度在300 - 375 ng/ul 之间,但不同存储库的浓度有所不同。每个DNA样本的浓度可在随货提供的浓度表上找到。
每个DNA样本的体积由以下公式确定:体积=DNA数量/浓度
6.DNA如何运输?
试管中的DNA在室温下运输且稳定,如果样品短期内不使用,请在到达后在 -20℃下冷冻。
7.DNA应如何保存?
DNA样本可在-80℃下无限期保存,应避免反复冻融循环以减少样本降解。建议将样本分成足够大小,以备将来在实验室使用。
8.如何重新测试DNA浓度?
建议使用Nanodrop或传统的基于比色皿的分光光度计,以TE作为适当的样品空白。DNA浓度可以根据A260值计算,1 O.D.相当于50 μg/ml双链DNA。
Coriell DNA样本已通过A260定量,或者通过Qubit检测定量。
9.DNA小瓶如何贴标签?
大多数小瓶都会有一个条形码标签,上面有批号和提取日期。