一、基本信息

产品编号：11201ES03/11201ES08/11201ES50/11201ES60

核心特点：热启动、高特异性、宽线性范围、操作简便

产品描述：Hieff qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) 是一种即用型的2X预混液，专为基于SYBR Green I染料的实时荧光定量PCR（qPCR）实验而优化。该预混液包含热启动Hieff DNA聚合酶、SYBR Green I荧光染料、dNTPs以及优化的Mg²⁺浓度。其独特配方整合了提升扩增效率和抑制非特异性扩增的因子，确保了在宽广的动态范围内获得优异的扩增线性与重复性，适用于无需ROX校正的多种实时荧光定量PCR仪。

二、产品应用

Hieff qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) 适用于多种基于DNA定量的分子生物学研究。

△基因表达分析：通过相对定量或绝对定量方法检测特定基因的mRNA表达水平。

△基因分型与SNP检测：用于鉴别特定的基因型或单核苷酸多态性。

△病原体检测：对病毒、细菌等病原体的核酸进行定性或定量检测。

△拷贝数变异分析：用于检测基因组DNA的拷贝数变化。

三、产品优势

✅热启动：采用的DNA聚合酶通过配体修饰实现热启动特性，有效抑制低温下的非特异性扩增，提升反应特异性。

✅高灵敏度：优化的反应体系与高性能聚合酶相结合，能够检测低丰度模板，灵敏度高。

✅宽线性范围：特殊配方确保了在数个数量级的模板浓度范围内均能获得良好的扩增效率与线性关系，定量准确。

✅操作简便：预混了除引物和模板外的所有必需组分，只需简单添加即可完成反应体系配制，减少操作步骤与污染风险。

✅仪器兼容性：专为无需ROX被动参考染料的实时荧光定量PCR系统设计，兼容主流品牌的多款机型。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 体系配制：在冰上按推荐比例混合预混液、引物、模板及无核酸酶水，轻柔混匀避免产生气泡。

2. 程序设置：根据实验需求在定量PCR仪上设置循环程序，可选择两步法（变性、退火/延伸）或三步法（变性、退火、延伸），并包含熔解曲线分析阶段。

3. 上机运行：将反应管置于定量PCR仪中，启动运行程序。

4. 结果分析：运行结束后，分析扩增曲线与熔解曲线，根据Ct值及熔解峰形态判断扩增特异性与定量有效性。

五、注意事项

1. 储存条件：本品需于-25~-15°C避光保存，避免反复冻融。因含荧光染料，配制体系时应避光。

2. 模板质量：推荐使用高质量的cDNA或DNA作为模板。若使用cDNA原液，建议适当稀释且加入体积不超过总反应体系的十分之一。

3. 引物设计：遵循引物设计基本原则，如长度、Tm值、GC含量及特异性等，并进行扩增效率验证，以确保定量结果的可靠性。

4. 体系优化：初次实验建议对引物浓度及退火温度进行优化，以获得最佳扩增效果。

5. 安全规范：操作时请穿戴实验服与手套，本品仅限于科研用途。

六、相关产品推荐

1. Hieff First Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (货号：11141ES)：用于高效、高保真地将RNA逆转录为cDNA，是基因表达qPCR分析的上游关键试剂。

2. Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix(货号：11184ES08)：一种通用型qPCR预混液，适用于需要或不需ROX校正的各种主流qPCR仪器平台。

3. Hieff qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox Plus) (货号：11202ES03)：适用于需要低浓度ROX染料进行孔间信号校正的特定qPCR仪器型号。