一、基本信息

产品名称：Sequencing Grade Modified Trypsin, Frozen

产品货号：V5113

规格：100µg (5 × 20µg)

保存温度：-70°C

二、产品介绍

Promega的Sequencing Grade Modified Trypsin, Frozen是一种经过修饰的猪胰蛋白酶，通过还原甲基化处理，使其对蛋白水解消化具有抵抗力，适用于蛋白质序列分析。

三、产品应用

△蛋白质序列分析：用于特定水解肽键，位于赖氨酸和精氨酸残基的羧基侧。

△高效液相色谱（HPLC）肽段分析：减少自溶产生的片段干扰。

△蛋白质消化：通过特定的蛋白酶与蛋白质比例进行消化。

四、产品优势

✅高稳定性：与未修饰的胰蛋白酶相比，修饰后的胰蛋白酶在酶稳定性测试中活性超过两倍。

✅高活性：通过TPCK处理和亲和纯化，获得高活性和稳定的分子。

✅易用性：提供20µg的小包装和稳定性优化的重悬液，便于操作和存储。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 蛋白变性：将目标蛋白溶解于6M盐酸胍或6-8M尿素中，加入50mM Tris-HCl (pH 8)，2-4mM DTT或β-巯基乙醇，加热至95°C保持15-20分钟或至少60°C保持45-60分钟。

2. 蛋白酶消化：添加修饰胰蛋白酶至蛋白酶:蛋白比例1:100至1:20，37°C下至少孵育1小时。

3. 终止反应：通过冷冻或添加特定抑制剂来终止反应，或通过降低pH值使胰蛋白酶失活。

六、注意事项

1. 活性差异：不同供应商的胰蛋白酶活性可能有很大差异，需要根据酶活性优化实验程序。

2. 避免反复冻融：为保持最大产品活性，限制冻融次数至五次或在重悬后分装成单次使用的小包装。

3. 使用前解冻：在25-30°C下解冻，轻轻混合后置于冰上直至使用，解冻后的胰蛋白酶不宜在冰上放置超过1小时。

七、相关产品推荐

1. Asp-N, Sequencing Grade（货号：V1621）

2. Arg-C, Sequencing Grade（货号：V1881）

3. Chymotrypsin, Sequencing Grade（货号：V1061）