一、基本信息
产品编号:C010-2-1
产品组分:谷草转氨酶基质液,2,4—二硝基苯肼液,4mol/L氢氧化钠液,2mmol/mL丙酮酸钠标准液,0.1mol/L磷酸盐缓冲液
产品描述:本产品是一种基于赖氏比色法原理的谷草转氨酶活性检测试剂盒,通过检测丙酮酸与2,4-二硝基苯肼反应产物的吸光度变化,实现对血清、血浆、组织及细胞样本中AST酶活力的准确定量,结果以卡门氏单位报告。
二、产品应用
本谷草转氨酶测试盒适用于多种生物样本中AST酶活性的测定。
△临床诊断:用于辅助评估肝脏、心肌等组织的损伤程度。
△基础研究:用于细胞生物学、药理学研究中细胞或组织代谢状态的检测。
△动物实验:用于实验动物模型(如肝损伤、心肌梗死模型)的生化指标分析。
△样本类型:适用于血清、血浆、组织匀浆及细胞裂解液等多种样本。
三、产品优势
✅原理可靠:基于成熟的赖氏比色法,与卡门氏分光光度法对比校准,确保结果准确性。
✅操作便捷:试剂预混分装,实验步骤标准化,无需复杂仪器。
✅兼容性强:提供针对液体样本(血清/浆)和固体样本(组织/细胞)的完整前处理与计算方法。
✅灵敏度高:优化的反应体系可有效检测低水平酶活性变化。
✅稳定性好:关键组分4℃保存,有效期长达6个月。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 样本制备:根据样本类型(液体、组织或细胞)进行相应处理,组织样本需冰浴匀浆后离心取上清,细胞样本需裂解。
2. 试剂配制:临用前,将试剂三按比例稀释为工作浓度(0.4 mol/L氢氧化钠溶液)。
3. 加样与孵育:依次向测定孔与对照孔中加入样本、预温的基质液(试剂一)及缓冲液,于37℃精确孵育规定时间。
4. 显色反应:孵育结束后,向各孔加入2,4-二硝基苯肼溶液(试剂二),再次于37℃孵育。
5. 终止与比色:反应结束后,加入0.4 mol/L氢氧化钠工作液终止反应,使用酶标仪于505 nm波长下测定各孔吸光度值。
6. 计算分析:将测得的吸光度值代入标准曲线,根据相应的计算公式得出样本的AST酶活力。
五、注意事项
1. 样本保存:血清样本中AST活性在室温(25℃)下可稳定2天,0-4℃可保存一周,-25℃可保存一个月,建议尽快检测。
2. 线性范围:若样本酶活力超过150卡门氏单位,需用生理盐水适当稀释后重新测定,以保证结果在线性范围内。
3. 质量控制:建议将正常血清对照孔的吸光度值作为日常质控指标,显著波动可能提示试剂或仪器问题。
4. 试剂预温:反应开始前,需将试剂一(基质液)提前5-10分钟置于37℃水浴或恒温箱中预温。
5. 标准曲线:本试剂盒采用赖氏法,其标准曲线单位通过与卡门氏分光光度法对比求得,计算结果时请使用配套的换算系数(0.482)。
6. 对照设置:常规血清样本内源性酮酸含量低,若其对照孔吸光度接近试剂空白,可用双蒸水替代血清设置对照。
六、相关产品推荐
1. 谷丙转氨酶(ALT/GPT)测试盒(货号:C009):用于检测血清或组织中谷丙转氨酶活性,是评估肝细胞损伤的经典指标。
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4. 丙二醛(MDA)测试盒(货号:A003-1-2):通过TBA法检测生物样本中的丙二醛含量,是评价脂质过氧化程度的常用指标。
5. BCA蛋白浓度测定试剂盒(货号:A045-3-2):用于快速、准确测定组织匀浆或细胞裂解液中的总蛋白浓度,为酶活力归一化(U/gprot)提供必要数据。