一、基本信息
产品名称:KOD FX DNA聚合酶
产品货号:KFX-101
规格:200U 200次反应
保存温度:-20°C
二、产品介绍
KOD FX是一种来源于嗜热古菌Thermococcus kodakaraensis KOD1的高性能DNA聚合酶。该酶通过热启动抗体技术,有效抑制聚合酶及3‘-5’外切酶活性,在反应前消除非特异性扩增。其具备强大的延伸能力和高保真度,可高效扩增高GC含量模板及复杂粗样品,并能进行长片段PCR。
三、产品应用
KOD FX DNA聚合酶适用于多种高要求的PCR扩增应用。
△高保真扩增:用于对保真度要求高的克隆、测序等下游实验。
△长片段PCR:用于扩增长达40 kb的基因组DNA片段。
△复杂模板扩增:适用于高GC含量模板或来自粗样品(如全血、组织裂解液)的DNA扩增。
△平端克隆:其PCR产物为平末端,可直接用于平端克隆。
四、产品优势
✅高保真性:其3‘-5’外切酶校对活性使错误率约为Taq DNA聚合酶的十分之一。
✅强延伸能力:可高效扩增复杂及长片段靶标,最大延伸长度达40 kb。
✅热启动设计:采用抗体介导的热启动机制,有效提高扩增特异性与灵敏度。
✅粗样耐受性:对多种复杂样品中的PCR抑制剂表现出良好的耐受性。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 体系配制:在冰上按推荐比例混合2× PCR Buffer、dNTPs、引物、模板及KOD FX酶。
2. 热循环设置:根据引物Tm值及目标片段长度,设置适宜的热变性、退火及延伸温度与时间。
3. 循环反应:将反应管置于热循环仪中,运行预定的PCR循环程序。
4. 产物分析:反应结束后,取适量产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。
六、注意事项
1. 引物设计:推荐使用22-35个碱基、Tm值高于60°C的引物;长片段扩增时建议Tm≥65°C。
2. 引物纯化:扩增≥10 kb长片段时,引物需经柱层析或HPLC纯化,以避免产物拖尾。
3. 产物纯化:进行酶切等后续操作前,必须对PCR产物进行纯化,以去除残留的聚合酶及3‘-5’外切酶活性。
4. 模板质量:使用粗样品时,可能需进行预处理以优化扩增效果。
七、相关产品推荐
1. KOD-Plus- DNA聚合酶(货号:KOD-201)
2. KOD -Plus- NEO(货号:KOD-401)
3. KOD FX Neo(货号:KFX-201)