一、基本信息

产品名称：Cell Counting Kit-8 (CCK-8)细胞计数试剂盒

产品货号：CK04

规格：100次测试、500次测试（5 ml x 1）、500次测试（5 ml x 5）、5000次测试（5 ml x 10）、5000次测试（100 ml x 1）

保存温度：0-5°C避光保存；长期储存建议-20°C

二、产品介绍

Cell Counting Kit-8 (CCK-8)是一种基于水溶性四唑盐WST-8的比色法检测试剂盒，用于便捷、灵敏地测定活细胞数量。WST-8在活细胞线粒体脱氢酶的作用下被还原生成水溶性的橙色甲臜染料，其生成量与活细胞数量成正比。该试剂为即用型单组分溶液，无需预先配制，操作简便，且灵敏度高于传统的MTT等检测方法。

三、产品应用

Cell Counting Kit-8 (CCK-8)主要应用于细胞增殖与毒性分析等研究领域。

△细胞增殖分析：评估药物、生长因子等对细胞增殖的影响。

△细胞毒性检测：测定化合物、环境因素等对细胞的毒性作用。

△细胞活力定量：快速、准确地测定培养体系中的活细胞数量。

△药物筛选：适用于高通量药物筛选平台中的初筛与剂量效应研究。

四、产品优势

✅高灵敏度：检测灵敏度优于传统的MTT、XTT、MTS或WST-1方法。

✅操作便捷：即用型单瓶溶液，无需复杂配制，可直接添加到培养体系中。

✅水溶性好：反应产物甲臜染料高度水溶，无需溶解步骤，减少操作误差。

✅安全性高：采用非放射性检测方法，避免使用放射性同位素带来的安全与处置问题。

✅兼容性好：与含酚红的培养基兼容，背景吸光度可通过设置空白对照扣除。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 细胞接种：将适量细胞悬液接种至96孔板中，于培养箱中预培养使细胞贴壁（如37°C, 5% CO2）。

2. 处理干预：对于增殖或毒性实验，加入不同浓度的待测物质，继续培养特定时间。

3. 添加试剂：每孔加入10 μl CCK-8溶液，确保添加体积约为培养总体积的10%。

4. 孵育反应：将培养板放回培养箱中孵育1至4小时，直至显色充分。

5. 检测读数：使用酶标仪在450 nm波长处测定各孔的吸光度值。

六、注意事项

1. 原理限制：本方法基于检测活细胞脱氢酶活性，任何影响该酶活性的条件或化合物均可能导致检测结果与真实活细胞数存在偏差。

2. 还原剂干扰：WST-8可能与还原性物质反应产生背景信号，使用含还原剂的体系时需设置对照检测本底。

3. 气泡影响：加样时需避免产生气泡，以免干扰吸光度读数。

4. 无菌处理：若需无菌试剂，请使用0.2 μm滤膜过滤CCK-8溶液。

5. 细胞类型与孵育时间：显色强度因细胞类型和数量而异，白细胞等显色较弱的细胞可能需要延长孵育时间（至4小时）或增加接种细胞数。

6. 浊度校正：若细胞悬液浊度较高，建议在600 nm或更高波长读取吸光度值并从样品值中扣除，以校正浊度干扰。

七、相关产品推荐

1. Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST（货号：CK12）

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