一、基本信息
产品名称:CALNP™ RNAi in vitro 转染试剂
品牌:多纳生物
货号:DN001-01/DN001-05/DN001-10
递送分子类型:小于扰RNA(siRNA)、微小RNA模拟物(miRNA mimic)、微小RNA抑制剂(miRNA inhibitor)、反义寡核苷酸(ASO)
细胞类型:适用于多种体外培养的哺乳动物细胞系
二、产品概述
CALNP™ RNAi in vitro 转染试剂是一种基于阳离子脂质纳米颗粒技术的核酸递送系统,专为体外RNA干扰(RNAi)实验设计。该试剂通过高效包裹并保护核酸分子,促进其进入细胞,实现基因表达的瞬时沉默,适用于基因功能研究与药物靶点验证。
三、产品应用
△基因功能研究:通过递送siRNA至细胞内,特异性降解靶标mRNA,从而研究特定基因的生物学功能。
△药物靶点验证:利用高效的基因沉默效果,在细胞水平验证潜在药物靶点的必要性与有效性。
△microRNA调控研究:通过转染miRNA mimic或inhibitor,模拟或抑制内源性miRNA活性,研究其调控网络。
四、产品优势与特点
✅高效转染:采用优化的阳离子脂质纳米颗粒配方,可实现多种细胞系的高效siRNA递送与基因沉默。
✅血清兼容性:转染复合物配制可直接使用含血清和抗生素的完全培养基,无需换用无血清或特殊优化培养基。
✅操作简便:转染流程标准化,复合物配制步骤明确,简化了实验操作。
✅应用广泛:除siRNA外,亦适用于miRNA mimic、inhibitor及ASO等多种核酸分子的递送。
五、使用说明(概述)
本产品为双组分(Reagent A与Reagent B)体系,适用于siRNA的瞬时转染,标准操作流程如下:
1. 细胞接种:建议在转染前24小时将细胞接种至培养板中,使其在转染时达到合适的汇合度。
2. 复合物配制:将Reagent A和Reagent B恢复至室温并涡旋混匀。在无菌管中,先加入siRNA溶液至Reagent A中混匀,再加入Reagent B混匀,室温静置孵育5分钟后,加入适量细胞培养液稀释混匀,即形成siRNA-转染试剂复合物。
3. 复合物添加:将配制好的转染复合物直接滴加至细胞培养孔中,轻轻摇晃培养板使其均匀分布。
4. 培养与分析:将细胞放回37°C、5% CO₂培养箱中继续培养。通常可在转染后24小时检测mRNA水平变化,48小时检测蛋白水平变化。
六、注意事项
1. 加样顺序:配制转染复合物时,必须严格按照先混合siRNA与Reagent A,再加入Reagent B的顺序进行,禁止将siRNA或任一试剂组分直接与大量培养液预先混合。
2. 换液时间:加入转染复合物后,24小时内请勿更换培养液。若需延长培养时间,可在24小时后更换新鲜培养液以维持细胞正常生长。
3. 核酸适用性:本试剂可用于转染其他小核酸分子(如miRNA mimic、ASO),使用时需根据目标核酸的分子量调整其工作浓度,使其与20 μM siRNA溶液的质量浓度保持一致。
4. 保存条件:产品需在2~8℃条件下保存,有效期一年;可常温运输。
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