一、基本信息

产品名称：BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Kit

产品货号：554714

规格：足够处理≥200个细胞样本

保存温度：2-8°C避光保存

二、产品介绍

BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Kit是一款用于流式细胞术分析的细胞固定与通透试剂盒。该试剂盒通过优化的固定/通透溶液与通透/洗涤缓冲液，在有效维持细胞形态与表面抗原表位的同时，使抗体能够进入细胞内部，从而实现对细胞内靶标蛋白（如细胞因子）的特异性荧光染色。

三、产品应用

本产品主要用于流式细胞术检测前的细胞样本制备，具体应用包括：

△细胞内细胞因子染色：用于检测经刺激后免疫细胞内合成的特定细胞因子。

△核内抗原染色：适用于需要对细胞核内转录因子或抗原进行染色的实验。

△胞内信号蛋白检测：用于分析细胞内的磷酸化蛋白等信号分子。

四、产品优势

✅高效固定：采用温和的甲醛基固定液，能有效交联蛋白并保持细胞结构完整性，同时减少表位遮蔽。

✅温和通透：配套的Perm/Wash™缓冲液能可逆地改变细胞膜通透性，确保胞内抗体有效渗透且细胞活性染料兼容性好。

✅流程标准化：预优化试剂比例与操作步骤，确保实验结果的稳定性和可重复性。

✅广泛兼容性：适用于多种细胞类型，包括外周血单个核细胞、培养细胞系及组织来源的细胞悬液。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 细胞准备：收集并计数待测细胞，完成必要的体外刺激与培养。

2. 表面染色：使用荧光标记抗体对活细胞进行细胞表面抗原染色。

3. 固定通透：加入固定/通透溶液，孵育以固定细胞并使其膜结构通透。

4. 胞内染色：用Perm/Wash™缓冲液洗涤后，在含该缓冲液的体系中加入针对细胞内靶标的抗体进行染色。

5. 清洗重悬：使用Perm/Wash™缓冲液或流式染色缓冲液清洗细胞，最后重悬于适量缓冲液中用于上机分析。

六、注意事项

1. 组分毒性：固定/通透溶液含有甲醛，操作应在通风橱中进行并做好个人防护。

2. 试剂保存：所有组分需避光保存于2-8°C，使用前请恢复至室温并混匀。

3. 样本处理：固定后的细胞可在Perm/Wash™缓冲液中于2-8°C避光保存最多3天，但建议尽快完成染色。

4. 对照设置：实验必须设置同型对照、未刺激对照或阻断对照，以正确界定阳性信号门。

5. 抗体兼容：建议使用经通透条件验证的抗体进行胞内染色，并优化抗体使用浓度。

七、相关产品推荐

1. 蛋白转运抑制剂BD GolgiStop™（货号：554724）

2. 蛋白转运抑制剂BD GolgiPlug™（货号：555029）