一、基本信息

产品编号：D2500-01/D2500-02/D2500-03

产品规格：100次，200次，500次

产品描述：本试剂盒采用独特的HiBind®硅胶膜技术与优化的缓冲液体系，专为从琼脂糖凝胶中回收70 bp至20 kb的DNA片段而设计。其原理是在特定条件下使DNA可逆地结合于硅胶膜基质，有效去除蛋白质、盐类及其他杂质，最终通过低盐缓冲液或去离子水洗脱获得高纯度DNA。回收率通常超过85%，纯化后的DNA可直接用于多种下游分子生物学应用。该试剂盒同样适用于从PCR、酶切等酶促反应液中直接纯化DNA。

二、产品应用

E.Z.N.A.® Gel Extraction Kit专用于从琼脂糖凝胶或酶促反应液中纯化DNA片段，为下游分子生物学实验提供高质量模板。

△DNA片段凝胶回收：从琼脂糖凝胶中分离并纯化特定大小的DNA条带。

△酶促反应液纯化：直接从PCR、限制性酶切、探针标记等反应体系中回收DNA产物。

△克隆与连接：为DNA连接反应提供纯净的插入片段或载体。

△测序与PCR：为Sanger测序、下一代测序及PCR扩增提供高质量模板。

△限制性酶切：纯化DNA以进行后续的酶切分析或克隆操作。

三、产品优势

✅高效回收：采用专有HiBind®基质，对70 bp至20 kb的DNA片段具有高结合容量与超过85%的回收效率。

✅操作快速：从切胶到完成洗脱，可在10分钟内获得纯化DNA，极大缩短实验周期。

✅高纯度保障：优化的XP2结合缓冲液与SPW洗涤缓冲液能有效去除引物二聚体、盐分、蛋白质及凝胶杂质，确保DNA纯度。

✅使用安全：全程无需使用苯酚、氯仿等有毒有机溶剂，实验操作更安全环保。

✅广泛兼容性：纯化后的DNA兼容连接、PCR、测序、酶切及标记等多种下游应用。

✅灵活便捷：提供离心柱法和真空抽滤法两种操作流程，并可单独购买耗材与缓冲液进行补充。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 电泳与切胶：通过琼脂糖凝胶电泳分离DNA样品，使用洁净刀片切取目标DNA条带所在的凝胶块。

2. 凝胶溶解：将凝胶块转移至离心管中称重，加入等体积的XP2结合缓冲液，于50-60°C孵育直至凝胶完全熔化。

3. 上柱结合：将不超过700 µL的DNA-凝胶溶液转移至置于收集管中的HiBind® DNA Mini Column内，室温下10,000 ×g离心1分钟，弃滤液；重复此步骤直至全部样品过柱。

4. 洗涤杂质：向柱中加入300 µL XP2结合缓冲液，最大转速离心1分钟；再加入700 µL已用乙醇稀释的SPW缓冲液，最大转速离心1分钟；可选择重复一次SPW缓冲液洗涤步骤。

5. 膜干燥：将空柱以最大转速离心2分钟，以彻底去除残留乙醇。

6. DNA洗脱：将柱子转移至新的离心管中，向膜中央加入15-30 µL洗脱缓冲液或去离子水，室温静置2分钟后，最大转速离心1分钟收集DNA。

7. 保存：建议将纯化后的DNA置于-20°C保存。

五、注意事项

1. 凝胶处理：切胶时应使用干净刀片，并尽量切除不含DNA的多余凝胶，以减少杂质携带。

2. 缓冲液配制：SPW缓冲液使用前必须按说明书要求用无水乙醇进行稀释，并室温保存。

3. 上样体积：每次上柱的DNA-凝胶混合液体积不应超过700 µL，以确保结合效率。

4. 干燥步骤：洗脱前的柱膜干燥离心至关重要，可避免残留乙醇影响下游酶促反应。

5. 洗脱条件：使用预热（约65°C）的洗脱缓冲液或去离子水，并确保液体加至膜中央，有助于提高洗脱效率。

6. 储存条件：未开封试剂盒组分可室温保存至少24个月；稀释后的SPW缓冲液也应室温保存，避免低温导致盐析。

六、相关产品推荐

1. E.Z.N.A.® Cycle Pure Kit（货号：D6492）：用于快速纯化PCR产物、酶切产物等，去除引物、dNTPs、盐及酶。

2. E.Z.N.A.® HP Total RNA Kit（货号：R6813）：采用玻璃纤维膜技术，可从多种样本中高效提取高纯度总RNA。

3. E.Z.N.A.® Soil DNA Kit（货号：D5625）：专为从土壤、粪便等复杂环境样本中提取高质量基因组DNA而设计。

4. Mag-Bind Blood DNA Kit（货号：M6221）：基于磁珠法，用于从全血、血清、血浆等液体样本中自动化或手动提取基因组DNA。