一、基本信息

产品名称：Opal™ 520 Reagent Pack

产品货号：FP1487001KT

规格：包含Opal 520试剂（干粉）1瓶，二甲基亚砜（DMSO）1管（100 µL）

保存温度：干粉试剂避光保存于-20°C；溶解于DMSO后，避光保存于4°C

二、产品介绍

Opal™ 520试剂盒是一款基于酪胺信号放大（TSA）技术的荧光染料试剂，专为多重免疫组化（mIHC）实验设计。该试剂盒提供的Opal 520染料在520 nm波长附近发射荧光，适用于与组织样本中的特定靶标进行高灵敏度的共价标记，兼容手动与自动化染色平台，旨在提升多重免疫荧光成像的分析能力。

三、产品应用

本产品Opal™ 520试剂盒主要用于多重免疫组化（mIHC）研究中的靶标标记与信号放大。

△免疫荧光标记：与一抗/二抗-HRP系统联用，对福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）或冰冻组织切片中的特定蛋白抗原进行高灵敏度荧光标记。

△多重染色：作为多色荧光标记面板中的一员，可在同一张组织切片上实现多个生物标志物的同步可视化与分析。

△信号放大：利用TSA技术，通过HRP催化产生大量沉积的荧光染料分子，实现信号级联放大，特别适用于检测低丰度靶标。

△自动化兼容：适用于自动化免疫组化染色平台，实现高通量、标准化的多重染色流程。

四、产品优势

✅高灵敏度：采用TSA技术，可实现信号级联放大，显著提高检测低表达靶标的灵敏度。

✅优异光谱特性：Opal 520染料具有明确的激发与发射光谱，便于与多色荧光面板中的其他染料进行光谱分离，减少串色。

✅操作灵活：提供标准化的试剂与稀释方案，兼容手动与自动化染色流程，应用场景广泛。

✅稳定性好：干粉试剂在建议条件下保存稳定，溶解后工作液可在一定时间内保持活性。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 试剂复溶：将提供的75 µL DMSO加入Opal 520干粉试剂瓶中，沿瓶壁反复吹打使试剂完全溶解，避免产生气泡。

2. 工作液配制：每次实验前，将复溶后的Opal 520染料原液用1X Amplification Diluent进行稀释。手动染色推荐稀释比例为1:100，自动化染色推荐稀释比例为1:150。

3. 染色应用：在完成一抗孵育及对应的HRP标记二抗或聚合物孵育后，将100-300 µL Opal荧光工作液滴加至组织切片上进行反应。

4. 信号淬灭：完成Opal染色后，需进行微波或热介导的抗原修复步骤，以淬灭HRP活性及抗体复合物，为下一轮染色做准备。

5. 成像分析：完成所有轮次的多重染色后，使用配备相应滤光片的多光谱或共聚焦荧光显微镜对样本进行图像采集与分析。

六、注意事项

1. 用途限定：本产品仅限用于科学研究，不适用于临床诊断或治疗。

2. 安全操作：试剂盒内含有的DMSO属于危险易燃化学品，操作时应佩戴一次性手套和护目镜，操作后彻底清洗双手。

3. 储存条件：未复溶的干粉试剂需避光保存于-20°C。复溶于DMSO后，应避光保存于4°C，避免反复冻融。

4. 工作液使用：Opal荧光工作液需现用现配，每张切片通常需100-300 µL，剩余工作液请丢弃，勿重复使用。

5. 有效期：请在包装盒标签标注的有效期内使用产品。

6. 知识产权：TSA技术及相关应用受多项专利保护，未经授权不得将本产品用于任何商业用途。

七、相关产品推荐

1. Opal™ 570试剂盒（货号：FP1488001KT）

2. Opal™ 690试剂盒（货号：FP1497001KT）

3. 1X Plus Manual Amplification Diluent（货号：FP1498）