一、基本信息
产品名称:TransIT®-LT1转染试剂
品牌:Mirus Bio
产品货号:MIR 2304/MIR 2300/MIR 2305/MIR 2306
规格:1× 0.4 ml/ 1×1.0 ml/ 5×1.0 ml/ 10×1.0 ml
递送分子类型:质粒DNA
细胞类型:多种哺乳动物细胞,包括原代细胞
二、产品概述
TransIT®-LT1转染试剂是一种专为高效递送质粒DNA至哺乳动物细胞而设计的阳离子聚合物转染试剂。其具有低细胞毒性、血清兼容性好且无需更换培养基的特点,适用于瞬时与稳定转染实验,广泛应用于基因功能研究、病毒包装及报告基因分析等领域。
三、产品应用
△基因表达:用于将外源基因表达质粒导入细胞,研究蛋白功能或生产重组蛋白。
△病毒生产:适用于辅助包装质粒与载体质粒共转染,以生产逆转录病毒或慢病毒等。
△RNA干扰:可用于转染表达短发夹RNA的质粒,实现基因敲低,用于功能缺失性研究。
△启动子分析:通过转染携带报告基因的启动子构建体,分析特定启动子的活性与调控机制。
四、产品优势与特点
✅高效转染:针对多种哺乳动物细胞系及原代细胞均能实现高水平的质粒DNA递送效率。
✅低细胞毒性:配方温和,对细胞生长状态影响小,有助于维持转染后细胞的正常生理活性。
✅血清兼容:转染复合物可直接加入含血清的完全培养基中,无需在转染前后更换为无血清培养基,简化操作流程。
✅应用灵活:既适用于短期基因表达的瞬时转染,也适用于通过抗生素筛选建立稳定细胞系的实验。
五、使用说明(概述)
瞬时DNA转染方案的常规步骤如下:
1. 细胞铺板:在转染前18-24小时,将细胞以适宜密度接种于含有完全生长培养基的培养器皿中,使其在转染时融合度达到80%或以上。
2. 复合物制备:使用前将试剂恢复至室温并轻柔涡旋。在无菌管中,用无血清培养基稀释质粒DNA,随后加入适量TransIT-LT1试剂,轻柔混匀后室温静置形成转染复合物。
3. 转染执行:将上述制备好的转染复合物逐滴加入细胞培养液中,轻柔摇晃培养皿使其均匀分布。
4. 培养与分析:将细胞放回培养箱中继续培养24-72小时,随后进行下游的基因表达或功能检测。
六、注意事项
1. 储存条件:本品需紧密盖好瓶盖,于4°C避光保存。使用前需平衡至室温并轻柔涡旋混匀,请勿冷冻。
2. DNA质量:为确保高转染效率,必须使用高纯度、无菌且无内毒素等污染的质粒DNA。
3. 条件优化:针对不同的细胞类型,建议预先优化试剂与DNA的比例以及细胞接种密度,以获得最佳转染效果。
4. 抗生素:在制备转染复合物的步骤中,应避免使用抗生素,以防干扰复合物形成。
5. 操作无菌:整个转染复合物制备与添加过程需在无菌条件下进行,以防细胞污染。
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