一、基本信息
产品编号:116560200/116560300
核心特点:快速、高效、适用于土壤
产品描述:FastDNA™ SPIN Kit for Soil是一款专为从复杂土壤样品中快速提取高质量基因组DNA而设计的试剂盒,其核心在于利用优化的裂解基质和缓冲液系统,有效克服土壤中腐殖酸等抑制物的干扰。
二、产品应用
FastDNA™ SPIN Kit for Soil专为从各类环境土壤样本中提取微生物基因组DNA而设计,适用于多种分子生物学下游应用。
△环境微生物研究:从土壤中提取微生物总DNA,用于群落结构分析。
△宏基因组学分析:为土壤宏基因组测序提供高质量的DNA模板。
△分子生态学研究:支持基于PCR的微生物多样性检测,如16S rRNA基因扩增子测序。
△病原体检测:从土壤中提取目标微生物DNA,用于特定病原体的分子诊断。
三、产品优势
✅高效裂解:采用专用裂解基质和机械匀浆步骤,能有效破碎包括革兰氏阳性菌在内的多种微生物细胞壁。
✅抑制物去除:优化的缓冲液体系可特异性沉淀并去除土壤中常见的腐殖酸、多酚等PCR抑制物。
✅快速纯化:整个操作流程可在1.5小时内完成,无需使用苯酚、氯仿等有毒有机溶剂。
✅高产量兼容性:可处理高达500mg的土壤样本,并对大体积样本或复杂细胞壁样本提供了优化的离心方案以提高得率。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 样本裂解:将土壤样本与裂解缓冲液加入含裂解基质的专用管中,使用FastPrep仪器进行高速匀浆,以破碎细胞释放核酸。
2. 杂质沉淀:离心去除不溶性碎片,转移上清后加入蛋白沉淀剂以分离核酸与杂质,再次离心后收集含核酸的上清液。
3. DNA结合:将结合基质悬液加入上清中,通过温和混匀使DNA特异性吸附至基质上。
4. 洗涤纯化:将吸附有DNA的结合基质转移至离心柱,依次使用洗涤液清洗以去除残留杂质。
5. DNA洗脱:晾干离心柱后,使用低盐洗脱液将纯化的DNA从结合基质上洗脱下来,离心收集。
五、注意事项
1. 试剂配制:使用前,必须在SEWS-M洗涤液中按要求加入指定体积的无水乙醇,并在瓶身标记配制日期。
2. 样本量:建议土壤样本量不超过500毫克,过量样本可能导致裂解不充分或抑制物残留。
3. 离心步骤:对于细胞壁复杂或样本量较大的情况,可适当延长首次离心时间至15分钟,以更彻底地去除碎片。
4. 结合效率:为确保DNA与结合基质的充分结合,建议在添加结合基质后使用15毫升离心管进行混匀操作。
5. 洗脱体积:为获得较高浓度的DNA,应使用能充分重悬结合基质的最小洗脱液体积(50-100μL),并可进行55℃孵育以提高洗脱效率。
六、相关产品推荐
1. FastDNA™ SPIN Kit for Feces(货号:116570200):专门用于从粪便样本中提取微生物DNA,有效去除胆汁盐等复杂抑制物。