一、基本信息
产品名称:线性聚乙烯亚胺转染试剂 (PEI MW40000, 速溶型)
产品货号:40816ES01/40816ES02/40816ES03/40816ES10
规格:5 mg, 100 mg, 1 g, 10 g
产品组分:线性聚乙烯亚胺 (PEI),分子量 40,000
递送分子类型:DNA (如质粒)
细胞类型:适用于多种贴壁和悬浮细胞系,包括HEK293、CHO、HEK-293T、Hela、HepG2、NIH/3T3、Sf9等。
二、产品概述
本产品是一种分子量为40,000的线性聚乙烯亚胺(PEI)阳离子聚合物转染试剂。其通过静电作用与带负电的核酸结合形成复合物,有效介导外源DNA进入细胞,实现高效的瞬时基因表达。该试剂具有细胞毒性低、转染效率高、适用细胞谱系广等特点,是哺乳动物细胞蛋白瞬时表达的常用工具。
三、产品应用
△蛋白表达:适用于在多种哺乳动物细胞中进行重组蛋白的瞬时高水平表达。
△基因功能研究:可用于将目的基因导入细胞,以研究其功能或进行报告基因检测。
△病毒包装:作为辅助质粒与目的质粒的共转染试剂,用于慢病毒、腺病毒等病毒的包装生产。
四、产品优势与特点
✅高效转染:在多种常见细胞系(如HEK293、CHO)中可实现高达80%-90%的转染效率。
✅低细胞毒性:相较于其他阳离子聚合物,对细胞的毒性较低,有利于转染后细胞的健康与表达。
✅速溶易用:产品为速溶型,在水中溶解迅速,配制储存液操作简便,无需预先调节pH助溶。
✅结构稳定:完全线性的聚合物结构,无丙酰基残留,确保了其与DNA结合性能的稳定性和高效性。
✅广泛适用:经验证适用于广泛的贴壁与悬浮细胞系,为不同实验体系提供可靠选择。
五、使用说明(概述)
本操作流程概述了使用本产品进行贴壁细胞瞬时DNA转染的关键步骤。
1. 细胞接种:于转染前一日接种细胞,确保转染时细胞处于对数生长期,密度约为70%-80%。
2. 复合物制备:使用无血清培养基分别稀释DNA与PEI转染试剂,随后将两者混合,室温静置10-15分钟以形成DNA-PEI复合物。
3. 细胞转染:移除细胞原有培养基,更换新鲜完全培养基,随后将复合物逐滴加入培养孔中,轻轻混匀。
4. 培养检测:将细胞放回培养箱继续培养,转染后5小时即可开始检测基因表达,最佳检测时间需根据实验目的优化。
六、注意事项
1. 储存特性:本品为固体粉末,易吸潮结块,需室温密封干燥保存,配制好的储存液建议分装并于4℃保存。
2. 比例优化:推荐的DNA与转染试剂质量体积比(μg:μL)为1:2,但针对特定细胞系,建议在1:0.5至1:3范围内进行优化。
3. 无菌操作:配制储存液需使用无菌超纯水并经0.22μm滤膜过滤除菌,所有操作应在无菌环境下进行。
4. 用途限定:本产品仅限于科研用途,不可用于临床诊断或治疗。
5. 安全防护:操作时请穿戴实验服与手套,避免直接接触皮肤或黏膜。
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