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Invivogen Blasticidin (10 mg/ml solution)

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Blasticidin (10 mg/ml solution)是一种高效的蛋白质合成抑制剂,广泛应用于转化细胞筛选。本品以无菌水溶液形式提供,确保了使用的便捷性和实验的一致性。通过特异性阻断原核与真核细胞的蛋白质合成,Blasticidin S Hydrochloride在哺乳动物细胞、植物细胞及大肠杆菌筛选中表现出色。每批次产品均经过HPLC纯度、内毒素水平和细胞培养验证,确保了产品的高质量和可靠性。

一、基本信息

产品名称:Blasticidin (10 mg/ml solution)

产品货号:ant-bl-05, ant-bl-1, ant-bl-5, ant-bl-5b

规格:50mg(5 x 1 mL);100mg(10 x 1 mL);500mg(50 x 1 mL);500 mg(50mL bottle)

保存温度:建议于4°C或-20°C避光保存,避免反复冻融。

二、产品介绍

本品为杀稻瘟菌素S的盐酸盐形式,是一种经无菌过滤的10 mg/mL水溶液,配制于HEPES缓冲液中。作为一种由灰色产色链霉菌产生的肽基核苷类抗生素,它能通过抑制核糖体上的肽键形成,特异性阻断原核与真核细胞的蛋白质合成,广泛应用于携带bsr或BSD抗性基因的转化细胞筛选。

三、产品应用

Blasticidin主要用于携带相应抗性基因的稳定转染细胞系的筛选与维持。

哺乳动物细胞筛选:用于筛选经转染并携带bsr或BSD抗性基因的哺乳动物细胞系。

大肠杆菌筛选:在特定条件下(如低盐LB琼脂,pH 8),用于筛选携带抗性基因的大肠杆菌转化子。

植物细胞筛选:作为显性选择标记,用于植物细胞的遗传转化实验。

四、产品优势

高效筛选:通过快速抑制蛋白质合成导致细胞死亡,可在转染后约7天内有效筛选出阳性克隆。

广泛适用:作用谱覆盖真核与原核细胞,适用于哺乳动物细胞、植物细胞及大肠杆菌的筛选。

严格质控:每批次产品均经过包括HPLC纯度(≥95%)、内毒素水平(<1 EU/mg)及细胞培养验证在内的多项严格质控,确保批次间一致性。

使用便捷:以即用型无菌溶液形式提供,浓度明确,简化实验流程。

五、使用说明(实验流程概要)

1. 浓度优化:在进行正式筛选前,需通过杀灭曲线实验确定特定细胞系的最低有效筛选浓度。

2. 培养基配制:将适量Blasticidin S储备液加入完全培养基中,混匀。哺乳动物细胞常用工作浓度为1-30 µg/mL。

3. 换液筛选:在细胞转染约24-48小时后,移去原培养基,更换为含适宜浓度Blasticidin S的筛选培养基。

4. 维持培养:定期更换筛选培养基(如每2-3天),持续约7-10天,直至未转染的对照组细胞全部死亡,抗性克隆形成。

5. 克隆扩增:挑取单克隆或混合阳性细胞群,于含Blasticidin S的维持培养基中继续培养。

六、注意事项

1. 安全防护:本品有害,操作时需穿戴适当的个人防护装备,并在生物安全柜中进行,使用后按有害化学品规范处理。

2. 浓度验证:不同细胞系对药物的敏感性差异显著,必须通过预实验优化确定最佳筛选浓度,不可直接套用文献值。

3. 储存条件:建议分装保存于-20°C以避免反复冻融。短期(2周内)使用可置于4°C。产品标签标明了有效期。

4. 溶液稳定性:工作浓度的药物溶液在细胞培养条件下会逐渐降解,建议筛选培养基现配现用或短期保存。

5. 实验对照:务必设置未转染的细胞作为药物处理的阴性对照,以准确评估筛选效果。

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