一、基本信息
产品名称:Blasticidin (10 mg/ml solution)
产品货号:ant-bl-05, ant-bl-1, ant-bl-5, ant-bl-5b
规格:50mg(5 x 1 mL);100mg(10 x 1 mL);500mg(50 x 1 mL);500 mg(50mL bottle)
保存温度:建议于4°C或-20°C避光保存,避免反复冻融。
二、产品介绍
本品为杀稻瘟菌素S的盐酸盐形式,是一种经无菌过滤的10 mg/mL水溶液,配制于HEPES缓冲液中。作为一种由灰色产色链霉菌产生的肽基核苷类抗生素,它能通过抑制核糖体上的肽键形成,特异性阻断原核与真核细胞的蛋白质合成,广泛应用于携带bsr或BSD抗性基因的转化细胞筛选。
三、产品应用
Blasticidin主要用于携带相应抗性基因的稳定转染细胞系的筛选与维持。
△哺乳动物细胞筛选:用于筛选经转染并携带bsr或BSD抗性基因的哺乳动物细胞系。
△大肠杆菌筛选:在特定条件下(如低盐LB琼脂,pH 8),用于筛选携带抗性基因的大肠杆菌转化子。
△植物细胞筛选:作为显性选择标记,用于植物细胞的遗传转化实验。
四、产品优势
✅高效筛选:通过快速抑制蛋白质合成导致细胞死亡,可在转染后约7天内有效筛选出阳性克隆。
✅广泛适用:作用谱覆盖真核与原核细胞,适用于哺乳动物细胞、植物细胞及大肠杆菌的筛选。
✅严格质控:每批次产品均经过包括HPLC纯度(≥95%)、内毒素水平(<1 EU/mg)及细胞培养验证在内的多项严格质控,确保批次间一致性。
✅使用便捷:以即用型无菌溶液形式提供,浓度明确,简化实验流程。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 浓度优化:在进行正式筛选前,需通过杀灭曲线实验确定特定细胞系的最低有效筛选浓度。
2. 培养基配制:将适量Blasticidin S储备液加入完全培养基中,混匀。哺乳动物细胞常用工作浓度为1-30 µg/mL。
3. 换液筛选:在细胞转染约24-48小时后,移去原培养基,更换为含适宜浓度Blasticidin S的筛选培养基。
4. 维持培养:定期更换筛选培养基(如每2-3天),持续约7-10天,直至未转染的对照组细胞全部死亡,抗性克隆形成。
5. 克隆扩增:挑取单克隆或混合阳性细胞群,于含Blasticidin S的维持培养基中继续培养。
六、注意事项
1. 安全防护:本品有害,操作时需穿戴适当的个人防护装备,并在生物安全柜中进行,使用后按有害化学品规范处理。
2. 浓度验证:不同细胞系对药物的敏感性差异显著,必须通过预实验优化确定最佳筛选浓度,不可直接套用文献值。
3. 储存条件:建议分装保存于-20°C以避免反复冻融。短期(2周内)使用可置于4°C。产品标签标明了有效期。
4. 溶液稳定性:工作浓度的药物溶液在细胞培养条件下会逐渐降解,建议筛选培养基现配现用或短期保存。
5. 实验对照:务必设置未转染的细胞作为药物处理的阴性对照,以准确评估筛选效果。
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