一、基本信息
产品名称:大鼠抗II型胶原蛋白IgG亚型抗体ELISA检测试剂盒
产品货号:20421T / 20422T / 20431T / 20432T / 20441T / 20442T
规格:96孔板(含可拆卸条带)
保存温度:-20°C
二、产品介绍
本产品为基于间接ELISA法,用于定量检测大鼠血清或血浆中针对II型胶原蛋白的特异性IgG1或IgG2a亚型抗体水平的试剂盒。该检测在胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型中,对于评估免疫反应、关节炎发展机制及免疫调节佐剂的效果具有重要研究价值。
三、产品应用
本大鼠抗II型胶原蛋白IgG亚型抗体ELISA检测试剂盒主要用于以下研究领域:
△胶原诱导性关节炎(CIA)模型研究:评估模型大鼠体内抗II型胶原蛋白IgG亚型抗体的动态变化。
△自身免疫性疾病机制研究:分析IgG亚型转换(如IgG2a/IgG2b向IgG1的转换)与关节炎严重程度的相关性。
△免疫调节疗法评估:用于评价不同佐剂或治疗策略对自身抗体亚型分布的影响。
△抗体特异性分析:可根据需求定制I型或不同物种来源的II型胶原蛋白包被板,用于抗体交叉反应性或特异性研究。
四、产品优势
✅特异性高:采用预包被特定物种II型胶原蛋白的板条,可特异性捕获目标IgG亚型抗体。
✅亚型区分:可单独定量IgG1或IgG2a亚型抗体,有助于深入理解Th1/Th2免疫应答偏向。
✅操作便捷:提供预包被板、即用型缓冲液及标准品,实验流程标准化,总时长约4.25小时。
✅灵活定制:支持根据研究需求,定制包被不同物种(大鼠、牛、猪)II型胶原或I型胶原的检测板。
✅宽检测范围:标准曲线范围为0.25至16 units/ml,可通过对样本进行梯度稀释适应更宽的抗体浓度范围。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 封闭:向所有孔中加入100 µl封闭缓冲液,室温孵育1小时。
2. 洗涤:弃去液体,使用1X洗涤缓冲液清洗反应板至少3次。
3. 加样:加入100 µl稀释好的标准品和待测样本,室温孵育2小时。
4. 洗涤:弃去液体,使用1X洗涤缓冲液清洗反应板。
5. 加二抗:加入100 µl稀释好的酶标二抗溶液,室温孵育1小时。
6. 洗涤:弃去液体,使用1X洗涤缓冲液清洗反应板。
7. 显色:加入100 µl TMB底物溶液,室温避光孵育15分钟。
8. 终止与检测:加入50 µl终止液,立即在450 nm波长下读取吸光度值,630 nm可作为参考波长。
六、注意事项
1. 样本处理:检测前建议对血清样本进行离心,以去除不溶性物质和脂质,确保检测准确性。
2. 稀释优化:对于抗体水平未知的样本,建议进行多个梯度稀释(如1:1000, 1:10000, 1:100000)以找到最佳稀释倍数。
3. 试剂回温:所有缓冲液及试剂在使用前应平衡至室温,结晶的20X洗涤缓冲液需温水浴溶解后使用。
4. 防止蒸发:每一步孵育后,建议使用封板膜覆盖板孔,特别是边缘孔,以防止液体蒸发。
5. 生物安全:试剂盒成分来源于动物,应作为潜在生物危害物质进行处理和废弃。
6. 数据解读:各IgG亚型抗体识别的表位可能不同,因此各亚型抗体浓度之和可能与总IgG检测结果存在差异。
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