一、基本信息

产品名称：Stbl3感受态细胞

产品货号：BC108-01

规格：20×100µl Stbl3感受态细胞，附带5µl pUC19质粒（0.1ng/µl）

保存温度：-70℃保存

二、产品介绍

Stbl3感受态细胞是源自大肠杆菌HB101菌株，经特殊工艺制备的高效感受态细胞。该细胞株特别适用于克隆含有同向重复序列等不稳定结构的DNA片段，如慢病毒载体和其他反转录病毒载体。其转化效率经pUC19质粒检测可达10^8 cfu/µg DNA，且在-70℃条件下可稳定保存数月。

三、产品应用

Stbl3感受态细胞主要用于克隆不稳定或具有重复序列的DNA载体。

△慢病毒载体克隆：是慢病毒载体系统推荐的宿主菌株，能有效提高克隆效率。

△反转录病毒载体构建：适用于其他含有长末端重复序列的反转录病毒载体克隆。

△不稳定质粒制备：用于常规但结构不稳定的质粒DNA的扩增与制备。

△抑制同源重组：其遗传背景能有效抑制长片段末端重复区之间的错误重组。

四、产品优势

✅高效转化：经pUC19检测，转化效率稳定在10^8 cfu/µg DNA水平。

✅遗传稳定：recA13和mcrB/mrr突变等基因型有效抑制了同源重组，保障了不稳定插入片段的完整性。

✅使用灵活：产品可进行分装使用，有助于降低单次实验成本并减少浪费。

✅保存稳定：在-70℃条件下可保存数月而转化效率不发生显著改变。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 解冻与分装：将感受态细胞置于冰浴中解冻，可根据需要将细胞悬液分装至预冷的无菌离心管中，并保持冰浴状态。

2. 加样与孵育：向感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻柔混匀后，在冰浴中静置30分钟。

3. 热激处理：将离心管置于42℃水浴中热激60秒，随后迅速转移至冰浴中冷却2分钟。

4. 复苏培养：向管中加入500μl无菌SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后于37℃、150rpm振荡培养60分钟。

5. 涂布平板：取适量复苏菌液，涂布于含相应抗生素的LB固体平板上，待液体吸收后，倒置平板于37℃培养12-16小时。

6. 菌液备份：将剩余转化菌液于4℃暂存，根据平板菌落生长情况决定是否使用。

六、注意事项

1. 储存：本品需于-70℃保存，应避免反复冻融，以免转化效率下降。

2. 操作：整个转化操作需在低温环境及无菌条件下进行，DNA加入体积建议不超过感受态细胞悬液体积的十分之一。

3. 对照：建议在转化实验中使用产品附带的pUC19质粒作为阳性对照，以评估感受态细胞的转化效率。

4. 备份：实验时建议保留部分连接产物或DNA样品，以备转化失败时重新实验。

七、相关产品推荐

1. LB肉汤培养基（货号：SH2010）

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