一、基本信息
产品名称:FuGENE® 6 Transfection Reagent
产品货号:E2693 (0.5ml) / E2691 (1ml), E2692 (5×1ml)
规格:0.5ml / 1ml / 5×1ml
产品组分:FuGENE® 6 Transfection Reagent
递送分子类型:DNA
细胞类型:多种哺乳动物细胞系,包括原代细胞
二、产品概述
FuGENE® 6转染试剂是一种非脂质体、低毒性的转染试剂,适用于将质粒DNA高效导入多种哺乳动物细胞。其独特配方允许在含有血清的培养基中直接进行转染,无需更换培养基或进行洗涤步骤,简化了操作流程,并有助于维持对血清敏感的细胞(如原代细胞)的活力与功能。
三、产品应用
△瞬时转染:高效介导质粒DNA进入细胞,用于短期基因表达和功能研究。
△稳定转染:可用于筛选获得稳定表达外源基因的细胞系,建议在施加筛选压力前优化瞬时转染条件。
△报告基因检测:适用于携带报告基因(如荧光素酶)的质粒转染,便于监测和优化转染效率。
四、产品优势与特点
✅低细胞毒性:非脂质体配方显著降低对细胞的毒性,有助于维持转染后细胞健康。
✅血清兼容性:可在含有血清的完全培养基中进行转染,特别适合原代细胞等需要持续血清培养的细胞类型。
✅操作简便:转染复合物加入细胞后无需更换培养基或洗涤,简化了实验步骤。
✅高转染效率:针对多种细胞系,可实现高效的DNA递送与基因表达。
五、使用说明(概述)
1. 复合物制备:将FuGENE® 6转染试剂与无血清培养基稀释液混合,随后加入纯化的质粒DNA,室温孵育15分钟以形成转染复合物。
2. 细胞准备:在转染前,确保目标细胞处于对数生长期并达到合适的汇合度(通常为70%-90%)。
3. 转染操作:将制备好的转染复合物均匀滴加至含有新鲜完全培养基(可含血清)的细胞培养孔中,轻柔混匀。
4. 培养与检测:将细胞放回培养箱继续培养,通常在转染后24-48小时进行基因表达或报告基因活性检测。
六、注意事项
1. 储存条件:试剂需储存于+2°C至+10°C,避免冷冻或置于0°C以下环境。
2. 条件优化:转染效率受试剂/DNA比例、DNA质量与用量、细胞类型及状态等多因素影响,必须针对每个细胞系进行条件优化。
3. DNA质量:用于转染的质粒DNA应高纯度,A260/A280比值在1.7-1.9之间,且无蛋白质与化学污染物。
4. 抗生素使用:转染期间培养基中若含有抗生素可能影响效率与细胞状态,建议在优化前避免使用或预先验证其影响。
七、相关产品推荐
1. FuGENE® HD Transfection Reagent(货号:E2311)
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