一、基本信息

产品名称：KOD FX Neo DNA聚合酶

产品货号：KFX-201

规格：200 reactions

保存温度：-20°C

二、产品介绍

KOD FX Neo是一种源自嗜热古菌Thermococcus kodakaraensis的高性能DNA聚合酶。作为KOD FX的升级版本，本品通过引入独特的“延伸增强剂”及热启动抗体修饰，显著提升了PCR扩增效率、长片段延伸能力以及对粗样本的耐受性，适用于从复杂样本中高效、高保真地扩增DNA片段。

三、产品应用

KOD FX Neo适用于多种高要求的PCR扩增应用：

△复杂样本直接扩增：可直接以未经纯化的生物样本（如组织裂解物、微生物细胞、食品或环境样本提取物）作为模板进行PCR。

△长片段扩增：其强大的延伸能力支持对长片段DNA（如人类基因组中长达40 kb的片段）进行有效扩增。

△高保真扩增：凭借其3‘-5’外切酶校对活性，保真度约为Taq DNA聚合酶的10倍，适用于对序列准确性要求高的实验。

△平末端产物生成：PCR产物为平末端，便于后续的平末端克隆等分子克隆操作。

四、产品优势

✅高耐受性：对粗样本中常见的PCR抑制剂具有较强耐受性，可直接使用裂解物进行扩增，简化前处理步骤。

✅高延伸性：独特的“延伸增强剂”能有效抑制平台效应，显著提高聚合酶的持续合成能力与延伸速率。

✅高保真性：具有3‘-5’外切酶校对活性，碱基错配率低，为测序、克隆等下游应用提供高准确度的DNA产物。

✅热启动：酶溶液中含特异性抗体，可在室温下抑制酶活性，有效防止引物非特异性退火及延伸，提高扩增特异性。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 反应体系配制：在冰上按比例混合2× PCR缓冲液、dNTPs、上下游引物、模板DNA及KOD FX Neo聚合酶，补足无核酸酶水至总体积。

2. PCR循环设置：将反应管置于热循环仪中，通常程序包括初始变性（如98°C，2分钟）、随后进行25-35个循环的变性、退火、延伸，最后进行终延伸。

3. 产物分析：PCR程序结束后，取适量反应产物进行琼脂糖凝胶电泳，以验证扩增片段大小及产量。

六、注意事项

1. 引物设计：引物长度建议22-35 bp，Tm值宜高于63°C，避免形成二级结构或引物二聚体，长片段扩增引物要求更高。

2. 模板质量：尽管耐受粗样本，但过高浓度的抑制剂或模板质量过差仍可能影响扩增效率，建议优化模板用量。

3. 循环条件：扩增长片段时需充分延长延伸时间（建议60秒/kb），并根据产物长度优化退火温度与循环数。

4. 产物克隆：PCR产物为平末端，进行克隆前需进行纯化以去除残留的酶和dNTPs，推荐使用专门的平末端克隆或TA克隆试剂盒。

七、相关产品推荐

1. KOD FX High success-rate DNA polymerase（货号：KFX-101）

2. KOD Dash High Speed & Efficient DNA polymerase（货号：LDP-101）

3. RT-PCR Quick Master Mix（货号：PCR-311F）