一、基本信息
产品名称:SYBR Green 实时荧光定量PCR预混液
产品货号:QPK-201
规格:5 x 1 mL
保存温度:-20℃避光长期保存;4℃可保存2个月,需避光
二、产品介绍
本产品是一种基于Taq DNA聚合酶的2X浓度实时荧光定量PCR预混液,适用于SYBR Green I染料法检测。该预混液已包含除引物外的所有反应组分,并采用抗Taq DNA聚合酶抗体的热启动技术,旨在提高扩增特异性与重复性。
三、产品应用
本SYBR Green实时荧光定量PCR预混液适用于多种实时荧光定量PCR应用场景。
△基因表达分析:用于cDNA模板的定量分析。
△基因分型与突变检测:适用于基因组DNA的靶序列检测。
△病原体检测:用于病毒或细菌核酸的快速定量。
△融解曲线分析:配合实验流程,可进行产物特异性验证。
四、产品优势
✅广泛兼容性:可适配多种主流实时荧光定量PCR仪,包括采用玻璃毛细管或被动参比染料的检测系统。
✅高特异性:内置热启动Taq DNA聚合酶,有效抑制低温下的非特异性扩增,确保结果准确。
✅即用便捷:预混了除引物外的所有必需组分,简化了加样步骤,减少操作误差与污染风险。
✅灵敏稳定:优化的缓冲体系提供高效的扩增性能,确保在宽动态范围内获得稳定、可重复的定量结果。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 体系配制:根据所用仪器类型,按推荐比例混合预混液、引物、模板及无核酸酶水至指定总体积。
2. 程序设置:在定量PCR仪上设置相应的循环程序,通常包括预变性、循环扩增(变性、退火/延伸)及融解曲线分析步骤。
3. 上机运行:将配好的反应管或板置于仪器中,启动运行程序。
4. 数据分析:运行结束后,使用仪器配套软件分析扩增曲线与融解曲线,进行定量计算与特异性评估。
六、注意事项
1. 保存条件:本品需避光保存,反复冻融可能影响性能,建议分装后于-20℃储存。
2. 引物设计:为获得最佳结果,推荐引物长度20-30 bp,GC含量40-60%,扩增子长度最好不超过150 bp。
3. 模板质量:使用高质量、无污染的DNA或cDNA模板,基因组DNA推荐用量为1-10 ng/反应。
4. 条件优化:对于一步法RT-qPCR等应用,可能需对引物浓度、酶量等条件进行优化以减少非特异性扩增。
5. 仪器设置:若使用具备被动参比染料校正功能的仪器,请将参比染料通道设置为ROX。
七、相关产品推荐
1. Realtime PCR Master Mix(货号:QPK-101)
2. THUNDERBIRD® Probe qPCR Mix(货号:QPS-101)
3.KOD SYBR® qPCR Mix(货号:QKD-201)