一、基本信息
产品名称:S-2222显色底物
产品货号:S820316
规格:25mg/瓶
保存温度:2-8°C干燥保存
二、产品介绍
S-2222是一种基于对硝基苯胺(pNA)的显色肽底物,主要用于检测凝血因子Xa(FXa)的活性,同时对胰蛋白酶也具有高度敏感性。该底物在特定蛋白酶作用下释放出黄色的对硝基苯胺,通过在405 nm波长下监测吸光度的增加速率,即可实现对酶活性的精确定量分析。
三、产品应用
S-2222显色底物主要用于凝血与纤溶系统相关酶活性的检测。
△血浆中凝血因子X(FX)的测定:用于评估FX的活性水平。
△血浆中凝血因子Xa(FXa)的测定:直接检测活化形式的FXa活性。
△血浆中FXa抑制物的检测:用于评估抗凝物质(如抗凝血酶)的活性。
△血浆中肝素的测定:基于肝素增强抗凝血酶抑制FXa的原理进行检测。
△血浆中凝血因子VIII(FVIII)的测定:通过凝血瀑布反应间接评估FVIII活性。
△鲎凝血酶的测定:用于内毒素检测相关的鲎试验。
△十二指肠液中胰蛋白酶的测定:用于胰腺外分泌功能的评估。
四、产品优势
✅高特异性:对FXa和胰蛋白酶具有高选择性,对多数其他测试酶类(如FIXa、激肽释放酶等)不敏感。
✅高灵敏度:具有较高的摩尔消光系数,可实现对低浓度酶活性的精确检测。
✅稳定性好:干粉状态在2-8°C下可稳定保存超过3年,配制的溶液在适当条件下也可稳定存放。
✅应用广泛:除主要靶点外,对枯草杆菌蛋白酶、顶体蛋白酶及FXIIa等也有响应,拓展了应用范围。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 复溶:使用去离子水或指定缓冲液溶解底物干粉,推荐浓度为1-4 mmol/L,可通过剧烈振荡或超声辅助以加速溶解。
2. 配制:将复溶后的底物溶液与含有待测酶的样本在适宜缓冲体系(如Tris缓冲液)中混合。
3. 孵育:将反应体系置于37°C恒温条件下孵育,启动酶促反应。
4. 监测:使用分光光度计,在405 nm波长下,连续监测反应体系吸光度值随时间的变化。
5. 计算:根据吸光度变化速率(ΔA/min),参照标准曲线或已知酶活进行计算,得出待测样本的酶活性。
六、注意事项
1. 储存条件:本品具一定吸湿性,必须干燥保存。溶液应避免微生物污染,以防底物非特异性水解。
2. 溶液配制:溶解过程较慢,需确保底物完全溶解以获得准确浓度。配制的工作液建议分装保存。
3. 干扰因素:实验过程中需注意避免引入其他丝氨酸蛋白酶污染,并确保反应缓冲液的pH值和离子强度符合要求。
4. 标准曲线:为获得准确结果,建议每次实验均建立相应的标准曲线。
七、相关产品推荐
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