一、基本信息
产品名称:萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒
产品货号:11401ES60 / 11401ES76 / 11401ES80
规格:100 T / 500 T / 1000 T
保存温度:-20℃保存
二、产品介绍
本产品是一种基于萤火虫萤光素酶(Firefly luciferase)的闪光型报告基因检测试剂盒。萤光素酶在ATP、镁离子和氧气存在下催化底物萤光素氧化发光,其产生的生物发光信号可通过化学发光仪检测。该试剂盒灵敏度高,适用于检测哺乳动物细胞、植物组织及原生质体等样本中报告基因的表达水平,是研究基因转录调控、信号通路及药物筛选的常用工具。
三、产品应用
本试剂盒用于检测萤火虫萤光素酶报告基因的表达活性,主要应用包括:
△基因转录调控研究:分析启动子、增强子等顺式作用元件的活性。
△信号通路分析:评估特定信号通路对下游基因表达的调控作用。
△药物筛选与药理学研究:检测化合物对特定基因表达的激活或抑制效应。
△植物分子生物学研究:适用于农杆菌介导的瞬时表达系统,检测植物叶片或原生质体中的报告基因活性。
四、产品优势
✅高灵敏度:采用优化的反应体系,能够检测极低水平的萤光素酶表达,背景信号低。
✅操作简便:提供即用型细胞裂解液和检测试剂,实验流程标准化,省时省力。
✅广泛兼容性:适用于多种样本类型,包括哺乳动物细胞、植物叶片组织及原生质体。
✅稳定性好:试剂组分在建议条件下保存稳定,检测结果重复性高。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 样本制备:根据样本类型(贴壁细胞、悬浮细胞、植物叶片或原生质体),使用配套裂解液进行裂解,冰上孵育5分钟。
2. 裂解物处理:可选步骤,将裂解产物于10,000-16,000 rpm离心1分钟,收集上清液用于检测。
3. 试剂平衡:检测前,将所有试剂平衡至室温(20-25℃)。
4. 加样与混合:取20 μL细胞裂解上清液,加入100 μL萤火虫萤光素酶检测试剂,充分混匀。
5. 信号检测:立即使用化学发光仪测定相对光单位(RLU),建议检测时间为2-10秒。
6. 数据分析:根据设置的空白对照、实验对照和实验组数据,计算报告基因的相对表达倍数。
六、注意事项
1. 实验准备:实验需自备PBS、白色不透光酶标板、移液器及化学发光检测设备。
2. 温度控制:酶促反应对温度敏感,检测前务必确保所有试剂与样本平衡至室温。
3. 仪器设置:不同仪器的检测灵敏度存在差异,建议将检测波长范围设定为350-700 nm。
4. 检测耗材:为减少孔间光信号干扰与损失,推荐使用白色不透光酶标板进行检测。
5. 操作一致性:为确保结果可比性,每个样品从加入检测试剂到上机检测的时间间隔应保持一致。
6. 样品保存:细胞裂解产物可在4℃短期保存,长期保存建议置于-80℃,并避免反复冻融。
7. 安全规范:操作时请穿戴实验服与手套,遵守实验室安全规程。
8. 用途声明:本产品仅限于科研用途。
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