产品名称:Anti-DYKDDDDK (Flag) 亲和纯化凝胶(分泌蛋白或膜蛋白)
产品货号:20583ES03 / 20583ES08 / 20583ES25 / 20583ES60
规格:1mL / 5mL / 25mL / 100mL
保存温度:-25~-15℃
二、产品介绍
本产品为将高亲和力的鼠源抗Flag标签单克隆抗体(克隆号3F5)共价偶联于4%高度交联的琼脂糖凝胶而制备的亲和纯化介质。该凝胶对Flag标签融合蛋白具有高结合容量(≥1.1 mg蛋白/mL凝胶)和低非特异性吸附特性,专为带有Flag标签的分泌蛋白或膜蛋白的亲和纯化与免疫沉淀实验而设计。
三、产品应用
本产品Anti-DYKDDDDK (Flag) 亲和纯化凝胶(分泌蛋白或膜蛋白)适用于多种Flag标签蛋白的纯化与富集应用。
△亲和纯化:从复杂样品中特异性分离Flag标签融合蛋白。
△免疫沉淀:用于Flag标签蛋白的免疫共沉淀研究。
△蛋白富集:对低丰度Flag标签蛋白进行浓缩与富集。
四、产品优势
✅高特异性:采用高亲和力单克隆抗体,确保对Flag标签蛋白的特异性识别与结合。
✅高结合容量:每毫升凝胶可结合至少1.1毫克目标蛋白,适用于高产率纯化。
✅广泛兼容性:可有效结合N端、C端及带甲硫氨酸修饰的N端Flag标签融合蛋白。
✅低背景:优化的凝胶基质与偶联工艺,有效降低杂蛋白的非特异性吸附。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 样品制备:制备澄清的细胞裂解液,建议预先去除不溶物并添加蛋白酶抑制剂。
2. 凝胶准备:充分混匀凝胶悬浮液,取适量凝胶进行装柱(层析法)或离心洗涤(IP法)。
3. 结合孵育:将样品与凝胶在适宜条件下孵育,使Flag标签蛋白与抗体充分结合。
4. 洗涤:使用TBS等缓冲液充分洗涤凝胶,去除未结合及非特异性结合的杂质。
5. 洗脱:使用酸性缓冲液、碱性缓冲液或Flag多肽竞争性洗脱,收集含目的蛋白的洗脱液。
6. 再生保存:使用后及时用酸性缓冲液清洗并平衡,于含保护剂的缓冲液中保存。
六、注意事项
1. 储存:必须在-25~-15℃保存,切勿在不含甘油的溶液中冻存,以防凝胶损坏。
2. 样品处理:上样前需确保样品澄清,无颗粒物,可通过离心或过滤处理。
3. 酸性处理:使用Gly-HCl等酸性缓冲液处理或清洗凝胶时,时间应控制在20分钟以内。
4. 洗脱中和:若采用极端pH洗脱,需立即对收集的洗脱液进行中和,以保护蛋白活性。
5. 凝胶保存:长期保存需置于含50%甘油和0.02%叠氮钠的TBS缓冲液中。
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