一、基本信息

产品编号：D6943-01/D6943-02/D6943-03

核心特点：高效纯化、高纯度、操作简便

产品描述：本试剂盒采用碱裂解法结合硅胶膜离心柱技术，用于从1.0-5.0 mL细菌培养液中快速、高效地小量提取高纯度质粒DNA。试剂盒提供离心与真空抽滤两种纯化方案，适用于常规分子生物学下游实验。

二、产品应用

E.Z.N.A.® Plasmid DNA Mini Kit I 适用于从细菌培养物中快速纯化质粒DNA，以满足多种分子生物学实验需求。

△分子克隆：为限制性酶切、连接、转化等克隆步骤提供模板DNA。

△DNA测序：提供高纯度质粒DNA，确保测序反应准确性。

△体外转录：纯化得到的质粒可作为体外转录的模板。

△PCR模板：为聚合酶链式反应提供高质量质粒DNA模板。

△细胞转染：纯化获得适用于哺乳动物细胞转染的高纯度质粒。

三、产品优势

✅高纯度：优化的缓冲液体系与高效的HiBind®硅胶膜能有效去除蛋白质、RNA、基因组DNA及内毒素等杂质。

✅高产量：从1-5 mL过夜培养菌液中，可稳定获得高产量的质粒DNA，满足多数实验需求。

✅操作灵活：提供离心柱法和真空抽滤法两种操作方案，用户可根据实验通量与设备条件灵活选择。

✅兼容性强：纯化获得的DNA可直接用于酶切、连接、测序、PCR、转染等多种下游应用。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 菌体收集：取1.0-5.0 mL过夜培养菌液，离心收集细菌沉淀。

2. 重悬裂解：弃上清，用含RNase A的Solution I重悬菌体，加入Solution II轻柔混匀裂解。

3. 中和沉淀：加入Solution III中和裂解体系，离心去除沉淀获得澄清裂解液。

4. 结合DNA：将澄清裂解液上清转移至HiBind® DNA Mini Column中，离心使DNA结合至硅胶膜。

5. 洗涤杂质：依次使用稀释后的HBC Buffer和DNA Wash Buffer洗涤结合柱，去除残留杂质。

6. 洗脱DNA：将柱子置于洁净离心管上，加入Elution Buffer，静置后离心洗脱获得质粒DNA。

五、注意事项

1. 组分保存：RNase A干粉需-20℃保存，加入Solution I后需2-8℃保存。Solution II需避免长时间暴露于空气。

2. 缓冲液配制：HBC Buffer与DNA Wash Buffer在使用前必须分别按说明书要求用异丙醇和无水乙醇进行稀释。

3. 裂解操作：加入Solution II后应轻柔混匀，避免剧烈振荡，且裂解液室温静置时间不宜超过5分钟。

4. 洗脱策略：首次洗脱可回收大部分DNA，根据对浓度或产量的不同需求，可选择不同的二次洗脱方案以优化结果。

5. 沉淀处理：若HBC Buffer、Solution II或Solution III因低温产生沉淀，使用前需于37℃水浴至沉淀完全溶解并混匀。

六、相关产品推荐

1. 质粒小量提取II型试剂盒（货号：D6945）：适用于需要更高纯度、更低内毒素水平的质粒提取，如细胞转染应用。

2. 质粒中量提取试剂盒（货号：D6904）：用于从更大体积（可达50 mL）的细菌培养物中提取质粒DNA，满足对DNA产量要求更高的实验。

3. 组织DNA提取试剂盒（货号：D3396）：用于从动物组织或细胞中高效提取基因组DNA。