一、基本信息

产品编号：D6945-01/D6945-02

核心特点：高纯度、高得率、操作便捷

产品描述：本产品为E.Z.N.A.® Plasmid DNA Mini Kit II，是一款基于硅胶膜吸附原理的质粒DNA小量提取试剂盒，适用于从1-5 mL细菌培养液中高效纯化高拷贝质粒DNA，所得DNA可直接用于酶切、连接、测序及转化等下游分子生物学实验。

二、产品应用

E.Z.N.A.® Plasmid DNA Mini Kit II适用于多种分子克隆实验的质粒制备。

△转化实验：纯化所得质粒DNA纯度高，可直接用于化学转化或电转化感受态细胞。

△酶切分析：提取的DNA不含抑制性杂质，适用于限制性内切酶消化反应。

△DNA测序：获得的质粒DNA质量满足Sanger测序对模板纯度的要求。

△连接反应：纯化产物可作为载体或插入片段，用于体外连接构建重组质粒。

三、产品优势

✅灵活性：提供5次、50次和200次反应三种规格，满足从预实验到常规制备的不同通量需求。

✅便捷性：所有组分均可常温运输与保存，简化了试剂的储存与物流管理。

✅完整性：试剂盒包含HiBind® DNA Mini Columns II、Collection Tubes及全套缓冲液，用户仅需自备乙醇和异丙醇即可开始实验。

✅稳定性：在推荐条件下保存，未开封试剂盒有效期长达24个月，保证了产品质量的长期稳定。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 菌体收集：取1-5 mL过夜培养的菌液，室温离心，弃尽上清，收集细菌沉淀。

2. 重悬裂解：使用预混RNase A的Solution I重悬菌体，加入Solution II轻柔混匀以裂解细胞。

3. 中和沉淀：加入Solution III中和裂解体系，离心后获得含质粒DNA的上清液。

4. 吸附纯化：将上清液转移至HiBind® DNA Mini Column II中，离心使DNA结合至硅胶膜。

5. 漂洗去杂：依次使用稀释后的HBC Buffer和DNA Wash Buffer洗涤结合柱，去除杂质。

6. 膜干燥：高速空离结合柱以彻底去除残留乙醇。

7. DNA洗脱：向膜中央加入Elution Buffer，静置后离心洗脱得到高纯度质粒DNA。

五、注意事项

1. 组分保存：收到试剂盒后，RNase A需立即置于-20℃保存；与Solution I混合后，该混合液应置于2-8℃储存。

2. 溶液处理：Solution II具有强碱性，使用后须立即拧紧瓶盖，防止吸收空气中二氧化碳而失效。

3. 沉淀溶解：若HBC Buffer、Solution II或Solution III因低温产生沉淀，使用前需于37℃水浴至沉淀完全溶解并混匀。

4. 缓冲液配制：实验前须严格按照说明书要求，使用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer，使用异丙醇稀释HBC Buffer。

5. 产品用途：本试剂盒仅供科学研究使用，不适用于临床诊断。

6. 正品保障：为确保产品质量及售后服务，请通过官方指定代理商渠道购买。

六、相关产品推荐

1. 无内毒素质粒小量提取试剂盒I（货号：D6948）：在标准纯化流程中整合内毒素去除步骤，特别适用于对核酸纯度要求极高的细胞转染实验。

2. 细菌基因组DNA提取试剂盒（货号：D3350-00/D3350-01）：采用柱式纯化法，可从细菌培养物中快速提取高分子量基因组DNA，用于PCR、酶切等分析。