一、基本信息

产品名称：PUREfrex 2.0重组无细胞蛋白合成试剂盒

产品货号：GFK-PF201-0.25-EX

规格：250 μL反应体系

保存温度：-80°C

二、产品介绍

PUREfrex 2.0是一款基于PURE系统技术开发的重组无细胞蛋白合成试剂盒。该系统由东京大学上田卓也教授团队原创，仅包含转录、翻译及能量再生所必需的纯化因子。通过向反应体系中加入模板DNA（或mRNA），即可在体外高效合成目标蛋白。本试剂盒由纯化组分构成，允许用户灵活调整反应体系组成。

三、产品应用

PUREfrex 2.0试剂盒适用于多种无细胞蛋白合成应用场景。

△体外蛋白表达：用于快速、高通量合成目标蛋白质。

△功能蛋白研究：适用于膜蛋白、毒性蛋白等难以在细胞内表达的蛋白质功能分析。

△蛋白质工程：支持通过引入非天然氨基酸等进行蛋白质修饰与改造。

△高通量筛选：可用于药物靶点筛选、酶进化等需要快速生成蛋白质的筛选平台。

四、产品优势

✅高纯度：通过优化核糖体、tRNA及所有反应蛋白的制备工艺，显著降低了内毒素、RNase及β-半乳糖苷酶等污染物。

✅无标签干扰：所有组分蛋白均不含纯化或检测标签，确保合成目标蛋白可自由携带任何所需标签进行后续纯化。

✅体系可调：反应体系由独立纯化组分构成，便于研究者根据实验需求调整各成分浓度。

✅低背景：相较于传统PURE系统，污染物水平极低，内毒素含量低于0.1 EU/升反应体系。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 解冻：将Solution I于30°C孵育1分钟解冻，随后置于冰上冷却；Solution II和Solution III直接置于冰上解冻。

2. 混匀：短暂涡旋混匀Solution I、II、III，并短暂离心使液体汇集管底。

3. 配制：在反应管中按顺序混合各溶液组分。

4. 加样：加入模板DNA至终浓度为每1kbp长度对应0.5-3 ng/μL。

5. 孵育：将反应管置于37°C孵育2至4小时。

6. 分析：对合成的蛋白质产物进行后续分析。

六、注意事项

1. 用途限制：本产品仅限体外研究使用，不可用于治疗、诊断、人或动物给药，亦不可作为食品或化妆品成分。

2. 无酶操作：实验全程需使用无核酸酶的水、试剂及耗材，以避免核酸降解。

3. 个人防护：操作时建议佩戴手套和口罩，防止污染。

4. 阳性对照：建议在20 μL反应体系中加入0.1 μL DHFR DNA作为蛋白合成反应的阳性对照，其核酸序列请访问官网获取。

5. 商业用途：如有商业用途需求，请联系GeneFrontier公司。

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