一、基本信息

产品名称：HEK-Blue™ Detection

产品货号：hb-det2 / hb-det3

规格：hb-det2为5袋装，hb-det3为10袋装，每袋可配制50毫升培养基

保存温度：未开封袋装产品应于2-8°C避光保存；复溶后的培养基在2-8°C可稳定保存2周，在-20°C可稳定保存2个月

二、产品介绍

HEK-Blue™ Detection是一种用于实时检测分泌型胚胎碱性磷酸酶（SEAP）的细胞培养基。该产品为研究者提供了一种快速便捷的监测SEAP表达的方法。当表达SEAP的细胞在该培养基中生长并分泌报告蛋白时，碱性磷酸酶活性会使培养基颜色转变为紫色/蓝色，从而实现可视化检测或通过酶标仪进行定量分析。

三、产品应用

HEK-Blue™ Detection主要用于基于SEAP报告基因系统的检测与分析。

△信号通路研究：适用于配体-受体相互作用、细胞因子效应及信号转导通路研究。

△启动子活性分析：用于评估特定启动子或增强子的转录活性。

△药物筛选：适用于高通量筛选平台，评估化合物对报告基因表达的调控作用。

△毒性测试：用于检测细胞毒性或应激反应对基因表达的影响。

四、产品优势

✅操作简便：无需裂解细胞，可直接在细胞培养上清中进行报告基因活性检测，简化实验流程。

✅实时监测：支持对SEAP分泌过程的动力学研究，可在培养过程中连续观察信号变化。

✅定量灵活：检测结果既可通过肉眼进行定性观察，也可使用酶标仪或分光光度计在620-655 nm波长下进行精确定量。

✅兼容性广：适用于多种板式实验（如96孔板），满足高通量筛选需求。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 培养基配制：将一袋HEK-Blue™ Detection粉末倒入无菌容器，加入50毫升细胞培养级水充分溶解。

2. 平衡与过滤：将复溶的培养基于37°C预热至少3小时，随后使用0.2 µm滤膜进行真空过滤除菌。

3. 细胞准备：消化并收集细胞，用PBS重悬后进行细胞计数。

4. 细胞悬液制备：将适量PBS重悬的细胞与HEK-Blue™ Detection培养基混合，调整至所需细胞浓度。

5. 加样与诱导：向孔板中加入SEAP诱导剂或阴性对照，再加入细胞悬液，建议吹打混匀。

6. 培养与孵育：将孔板置于37°C、5% CO2培养箱中孵育过夜。

7. 活性检测：通过肉眼观察颜色变化或使用酶标仪读取620-655 nm处的光密度值以确定SEAP活性。

六、注意事项

1. 储存条件：未开封产品需严格在2-8°C避光保存，具体有效期请参见产品分析证书。

2. 无菌操作：复溶后的培养基必须经0.2 µm滤膜过滤除菌后方可使用，所有操作需在无菌环境下进行。

3. 使用前平衡：过滤后的培养基使用前需在37°C充分平衡，以确保细胞生长条件最佳。

4. 避免反复冻融：复溶后若分装冻存，应避免反复冻融以保持试剂稳定性。

七、相关产品推荐

1. pSELECT-zeo-SEAP报告基因质粒（货号：psetz-seap）

2. QUANTI-Blue™ SEAP检测试剂（货号：rep-qbs）

3. 重组SEAP蛋白（货号：rec-hseap）