一、基本信息

产品名称：WesternBright ECL 化学发光HRP底物

产品货号：K-12045-C20 / K-12045-D20 / K-12045-D50

规格：20ml / 200ml / 500ml

保存温度：室温

二、产品介绍

WesternBright ECL是一种增强型化学发光底物，专为辣根过氧化物酶标记的蛋白印迹检测而设计。该产品能够在短时间内产生高强度信号，具备高灵敏度，同时信号持续时间长，便于多次成像。

三、产品应用

WesternBright ECL底物主要用于基于辣根过氧化物酶标记的化学发光检测。

△蛋白印迹检测：用于检测经SDS-PAGE分离并转印至固相膜上的目标蛋白。

△其他HRP检测：适用于其他需要HRP催化的化学发光检测体系。

四、产品优势

✅高灵敏度：在短时间内即可产生强化学发光信号，适用于低丰度蛋白检测。

✅信号稳定：发光信号持续时间长，允许对同一印迹膜进行多次曝光，不会丢失信息。

✅操作便捷：试剂组分稳定，可在室温条件下储存至少一年，无需冷藏。

✅兼容性广：与多种电泳系统、转印方法以及硝酸纤维素膜和PVDF膜兼容。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 制膜：通过SDS-PAGE分离蛋白样品，并将蛋白电转至固相支持膜上。

2. 封闭：将印迹膜在室温下用封闭液孵育一小时，以降低非特异性背景。

3. 一抗孵育：将印迹膜与针对目标蛋白的一抗在室温下孵育一小时，并保持轻柔振荡。

4. 洗涤：使用洗涤缓冲液对印迹膜进行充分洗涤，以去除未结合的一抗。

5. 二抗孵育：将印迹膜与HRP标记的二抗在室温下孵育一小时，并保持轻柔振荡。

6. 再次洗涤：使用洗涤缓冲液彻底洗去未结合的二抗。

7. 底物孵育：将WesternBright ECL的A液和B液按1:1比例混合，均匀覆盖膜表面，孵育两分钟。

8. 显影：吸去多余底物溶液，覆盖保鲜膜后，使用X光胶片或CCD成像系统进行检测。

六、注意事项

1. 用途限定：本产品仅供研究使用。

2. 个人防护：操作膜和试剂时需佩戴手套。

3. 储存条件：试剂在室温下稳定，冷藏储存可能缩短其有效期。

4. 试剂处理：若试剂因运输原因处于低温状态，首次使用前应在室温下静置至少24小时并充分摇匀。

5. 膜处理：若使用PVDF膜，需先用甲醇浸润活化，再用水和转印缓冲液平衡。

七、相关产品推荐

1. WesternBright ECL-spray（货号：K-12049-D50）

2. WesternBright Quantum HRP substrate（货号：K-12042-C20）

3. WesternBright Sirius HRP substrate（货号：K-12043-C20）