一、基本信息

产品名称：KOD-Plus- DNA聚合酶

产品货号：KOD-201

规格：200 U (200次反应)

保存温度：-20°C

二、产品介绍

KOD-Plus-是一种来源于嗜热古菌Thermococcus kodakaraensis KOD1的高保真DNA聚合酶。该酶具有强大的3‘→5’外切核酸酶（校对）活性，并通过抗KOD DNA聚合酶抗体实现热启动功能，能有效抑制非特异性扩增，适用于对保真度要求高的长片段PCR扩增。

三、产品应用

KOD-Plus-适用于多种高保真PCR应用场景。

△高保真扩增：用于对序列准确性要求极高的基因克隆、定点突变和测序文库构建。

△长片段扩增：能够高效扩增长达21 kb的λ噬菌体DNA、12 kb的人类基因组DNA及7 kb的cDNA片段。

△平端产物制备：凭借其校对活性，可产生平末端PCR产物，便于后续的平端克隆操作。

四、产品优势

✅高保真性：其3‘→5’外切核酸酶校对活性使错误率比普通Taq DNA聚合酶低约80倍。

✅热启动设计：酶溶液中的特异性抗体可在低温下抑制聚合酶活性，显著减少引物二聚体和非特异性扩增。

✅扩增能力强：优化体系可支持从复杂模板中高效扩增不同长度的目标片段，包括高GC含量区域。

✅产物兼容性：产生的平端PCR产物可直接用于平端克隆，或经处理后进行TA克隆。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 体系配制：除酶外，将所有反应组分完全解冻并混合于冰上，最后加入KOD-Plus-酶。

2. 热循环：采用三步法PCR程序，包括初始变性、多轮循环（变性、退火、延伸）及最终延伸。

3. 产物分析：反应结束后，可取PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，以验证扩增效率和特异性。

六、注意事项

1. 引物设计：推荐引物长度为22-34 nt，Tm值高于60°C，长片段扩增宜使用25-34 nt且Tm≥65°C的引物。

2. 产物处理：PCR产物需纯化后再进行限制性内切酶消化，因为反应后体系中残留的3‘→5’外切核酸酶活性可能影响酶切效率。

3. 条件优化：针对高GC含量模板，可尝试添加2-5%的DMSO以提高扩增效率。

4. 克隆策略：该酶产生平末端产物，若需进行TA克隆，需使用配套的加A尾试剂对产物进行末端处理。

七、相关产品推荐

1. Deoxyribonucleotides(dNTPs)（货号：NTP-201）

2. KOD One™ PCR Master Mix（货号：KMM-101）

3. KOD FX（货号：KFX-101）