一、基本信息
产品名称:TransIT-mRNA Transfection Kit
产品货号:MIR 2225 / MIR 2250 / MIR 2255 / MIR 2256
规格:0.5 mL
产品组分:TransIT-mRNA 试剂,mRNA Boost 试剂
递送分子类型:RNA (mRNA, 病毒RNA等,2-10 kb)
细胞类型:适用于多种哺乳动物细胞系
二、产品概述
TransIT-mRNA Transfection Kit 是一种高效、低细胞毒性的RNA转染试剂盒,专为将RNA分子直接递送至细胞质而设计。该试剂盒采用阳离子脂质体技术,能够绕过细胞核转录过程,实现快速、直接的蛋白表达。其配方与含血清培养基兼容,可在不更换培养基的条件下进行转染,简化操作流程,适用于多种基于RNA的瞬时表达研究。
三、产品应用
△蛋白表达研究:用于实现外源mRNA在细胞中的快速、瞬时蛋白表达,适用于功能研究与蛋白生产。
△病毒学研究:适用于病毒RNA的转染,用于病毒包装、复制机制研究与病毒拯救实验。
△基因功能分析:通过递送特定mRNA,在转录后水平研究基因功能,避免质粒DNA整合带来的潜在影响。
△疫苗研发:可用于体外递送自复制RNA或mRNA疫苗候选分子,进行免疫原性与表达效率的评估。
四、产品优势与特点
✅高效递送:采用优化的脂质纳米颗粒配方,能高效包裹并保护RNA分子,实现高转染效率。
✅低细胞毒性:配方温和,在有效递送RNA的同时,对细胞活力和状态影响极小。
✅血清兼容性:转染过程可在含有血清的完全培养基中进行,无需更换为无血清培养基,操作简便且有利于细胞健康。
✅应用广泛:适用于多种类型的RNA分子(2-10 kb)及多种哺乳动物细胞系,具有广泛的适用性。
✅快速表达:RNA直接进入细胞质翻译,避免了DNA的转录过程,能够实现数小时内快速检测到蛋白表达。
五、使用说明(概述)
以下为基于12孔板规格的瞬时RNA转染方案概述,使用其他规格培养器皿时需按表面积比例调整试剂用量。
1. 试剂准备:将TransIT-mRNA试剂与mRNA Boost试剂置于室温平衡,使用前轻微涡旋混匀。
2. 复合物制备:在无菌离心管中,用100 µL无血清稀释培养基稀释1 µg RNA,随后依次加入2 µL mRNA Boost试剂和2 µL TransIT-mRNA试剂,每加一试剂后需轻柔混匀。
3. 孵育复合物:将混合液在室温下静置孵育2-5分钟,以形成转染复合物。
4. 添加至细胞:将形成的转染复合物逐滴加入已更换为完全培养基的细胞培养孔中,通过轻柔晃动培养板使分布均匀。
5. 培养与分析:将细胞放回培养箱继续培养,根据实验需求在转染后4-48小时收获细胞并进行后续检测。
六、注意事项
1. 储存条件:本品应置于4°C储存,避免冷冻。使用前需恢复至室温并轻微涡旋。
2. RNA质量:转染效率高度依赖于RNA的纯度与完整性,建议使用高纯度、无RNase污染的RNA样品。
3. 条件优化:为达到最佳转染效果,建议针对特定细胞系对细胞密度、RNA用量及试剂比例进行预实验优化。
4. 复合物时效:转染复合物形成后应在5分钟内使用,避免长时间孵育导致活性下降或聚集。
5. 细胞状态:使用对数生长期、状态良好的细胞进行转染,适宜的细胞汇合度(通常为70-90%)是成功的关键。
七、相关产品推荐
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