一、基本信息
产品名称:糖原检测试剂盒
产品货号:MKG3985
规格:100次检测
保存温度:-20°C
二、产品介绍
本试剂盒提供了一种基于酶学反应的糖原定量检测方法。其原理是通过单一工作试剂将糖原酶解为葡萄糖并进行检测,反应产物在570 nm处的吸光度或530/585 nm处的荧光强度与样品中糖原浓度成正比。该操作简便,可在室温下30分钟内完成,适用于多种生物样本的检测。
三、产品应用
本糖原检测试剂盒适用于定量检测糖原含量及评估药物对糖原代谢的影响。
△样本类型:适用于血清、血浆、尿液、唾液、乳汁、细胞培养基、食品及农产品等多种样本。
△研究领域:应用于糖原代谢相关研究,如糖尿病、糖原贮积症等代谢性疾病机制探索。
△药物研发:用于评估药物对糖原合成与分解途径的影响,服务于药物发现与药效评价。
四、产品优势
✅灵敏度:检测灵敏度高,比色法线性范围为2-500 µg/mL,荧光法可达0.2-50 µg/mL。
✅准确性:采用酶学检测原理,结果准确可靠,与糖原浓度线性关系良好。
✅简便性:操作流程简化,仅需添加单一工作试剂,室温孵育3-5分钟即可读数。
✅高通量:兼容96孔板操作,适合批量样本检测,便于实现自动化。
✅样本量:所需样本量少,仅需10 µL澄清上清液即可进行检测。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 样本处理:将组织或细胞样本于冰上在预冷的25 mM柠檬酸(pH 4.2,含2.5 g/L NaF)缓冲液中匀浆,14000 g离心5分钟,取10 µL上清待测。
2. 试剂平衡:实验前将所有试剂组分平衡至室温,解冻后的试剂请置于冰箱或冰上保存。
3. 标准品制备:用去离子水稀释糖原标准品,以建立标准曲线(比色法推荐浓度梯度为0-500 µg/mL)。
4. 加样:向透明平底(比色法)或黑色平底(荧光法)96孔板中分别加入10 µL标准品、样本及空白对照。
5. 预孵育:向各孔加入20 µL试剂C(若样本含葡萄糖,则样本空白孔加20 µL去离子水),轻拍混匀,室温孵育5分钟。
6. 工作试剂配制与添加:按比例混合试剂A、B和D,配制工作试剂。每孔加入100 µL工作试剂,轻拍混匀。
7. 检测孵育:室温孵育3-5分钟。
8. 读数:使用酶标仪读取570 nm处吸光度(比色法)或530 nm激发/585 nm发射处的荧光强度(荧光法)。
六、注意事项
1. 反应特性:本检测基于动力学反应,建议使用多通道移液器添加工作试剂以确保反应起始时间一致。
2. 干扰物质:样本制备过程中应避免使用含巯基的试剂(如DTT、β-巯基乙醇),以免干扰检测反应。
3. 样本处理:组织细胞样本匀浆及离心步骤需在低温下进行,以保持糖原稳定性。
4. 标准曲线:每次实验均需制备新鲜的标准曲线,并设置空白对照进行校准。
5. 仪器适配:根据检测方法(比色或荧光)选择相应材质的微孔板,以确保检测信号准确性。
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