一、基本信息

产品名称：PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)

产品货号：RR037Q / RR037A / RR037B

规格：20Rxns / 200Rxns / 200 Rxns×4

保存温度：-20℃

二、产品介绍

本产品是专为实时荧光定量RT-PCR设计的反转录试剂盒。其核心组分PrimeScript RTase具有强大的延伸能力，可在短时间内高效合成高质量的cDNA，操作简便，适用于高通量基因表达分析。该试剂盒为两步法实时荧光定量RT-PCR提供了优化的反转录解决方案。

三、产品应用

本产品主要用于将RNA模板反转录为cDNA，适用于多种基于实时荧光定量PCR的基因表达分析应用。

△基因表达定量分析：用于检测特定基因在不同样本中的mRNA表达水平。

△高通量筛选：其简单快速的操作流程适合进行大量样本的平行分析。

△两步法RT-qPCR：作为第一步反转录反应，与配套的qPCR预混液联用，完成完整的基因表达检测。

四、产品优势

✅高效反转录：采用高性能的PrimeScript RTase，可在15分钟内完成高效cDNA合成，保证后续qPCR的灵敏度。

✅引物灵活性：同时提供Oligo dT引物和Random 6 mers引物，用户可根据RNA完整性和实验目的灵活选择或组合使用。

✅体系兼容性：针对TB Green染料法和探针法qPCR分别提供了优化的反应体系，确保与主流检测方法无缝衔接。

✅准确定量支持：试剂盒内含专用的EASY Dilution缓冲液，便于对总RNA或cDNA进行系列梯度稀释，有助于建立准确、线性范围广的标准曲线。

五、使用说明（实验流程概要）

以TB Green qPCR分析法为例，实验流程概要如下：

1. 反应体系配制：在冰上按顺序加入5X PrimeScript Buffer、PrimeScript RT Enzyme Mix I、Oligo dT Primer、Random 6 mers、总RNA模板，并用RNase Free dH2O补足至10 μl。

2. 反转录反应：将反应体系置于PCR仪中，设置程序为37℃孵育15分钟。

3. 酶失活：反转录反应结束后，立即将温度升至85℃并保持5秒，以灭活反转录酶。

4. 产物保存：反应完成后可将cDNA产物置于4℃短期保存或-20℃长期保存，用于后续qPCR检测。

六、注意事项

1. 防RNase污染：所有实验操作应在无RNase污染的环境中进行，并使用RNase free的耗材与试剂。

2. 预混液配制：当进行多个平行反应时，推荐预先配制不含模板的Master Mix，混匀后再分装至各反应管，以提高反应的一致性和重复性。

3. 酶保存与使用：PrimeScript RT Enzyme Mix I在使用前应短暂离心，确保酶液聚集于管底；使用后应立即放回-20℃保存。

4. 模板质量：总RNA的纯度与完整性是获得高质量cDNA的关键，建议使用高纯度RNA并避免基因组DNA污染。

七、相关产品推荐

1. TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (货号：RR820Q)

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3. TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (货号：RR420Q/A/B)

4. Probe qPCR Mix (货号：RR391S/A/B)