一、基本信息
产品编号:SN4001(提供 S/M/L 三种规格)
分离方法:阴性磁分选,无需色谱柱,仅需磁极
分离目标:小鼠脾脏 CD19⁺ B 细胞
核心组分:EasyIsoTM Mouse CD16/CD32 Blocker、EasyIsoTM Mouse B Cell Isolation Cocktail、EasyIsoTM Streptavidin Nanobeads
保存条件:4 °C 避光保存,严禁冻融
运输条件:4 °C 冷链运输
二、产品应用
本试剂盒可在 18–20 min 内从小鼠脾脏获得高纯度 CD19⁺ B 细胞,满足下游多场景研究需求。
△ 免疫学:提供未受抗体-磁珠直接触动的原态 B 细胞,适用于信号通路及功能研究。
△ 体外激活:分选后细胞可直接用于 TLR 或 BCR 激动剂刺激,检测增殖与抗体分泌。
△ 过继转移:高活性细胞保证受体小鼠体内重建效率,用于自身免疫或感染模型。
△ 单细胞组学:≥90 % 的纯度降低背景噪音,提高单细胞 RNA 测序数据质量。
三、产品优势
✅ 高纯度:阴性分选后 CD19⁺ 比例稳定 ≥90 %,最高可达 99 %。
✅ 高活性:磁珠仅结合非靶细胞,避免 B 细胞表面受体交联与信号干扰。
✅ 快速:全程 18–20 min,显著缩短实验时间并提高细胞存活率。
✅ 免裂红:脾脏研磨过滤后可直接分选,无需红细胞裂解步骤。
✅ 灵活:提供 S/M/L 三种规格,覆盖 1×10⁷–2×10⁹ 总细胞处理量。
四、使用说明(操作步骤概要)
1. 研磨:70 μm 滤网轻柔研磨小鼠脾脏,400 g 离心 5 min 后重悬于 FACS Buffer。
2. 封闭:按 100 μL/mL 加入 CD16/CD32 Blocker,轻混。
3. 标记:同比例加入 B Cell Isolation Cocktail,室温孵育 10 min。
4. 磁珠:震荡混匀 Streptavidin Nanobeads 后按 100 μL/mL 加入,室温静置 5 min。
5. 稀释:补加 FACS Buffer 至 2.5 mL(5 mL 管)或 7.5 mL(15 mL 管)。
6. 分选:置磁极 3–5 min,倾斜收集上清,400 g 离心 10 min 获得纯化 B 细胞。
五、注意事项
1. 无菌:全程在生物安全柜内操作,防止微生物污染。
2. 防冰:试剂及细胞悬液禁止冰浴或冷冻,以免磁珠聚集。
3. 速用:分选后的 B 细胞建议立即用于下游实验,放置不超过 4 h。
4. 校准:磁极每次使用前后用 70 % 乙醇擦拭,确保磁场均匀。
5. 缓冲:务必使用含 2 % FBS 与 0.02 % EDTA 的 FACS Buffer,避免钙镁致细胞成团。
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