一、基本信息
产品编号:AM2001(提供 S/M/L 三种规格)
培养基:RPMI-1640+10 % FBS+2 mM L-Glutamine+100 U/mL 青霉素/链霉素+55 μM β-ME
核心组分:ActBeadsTM Mouse CD3/CD28 Activator
保存条件:4 °C 避光保存,严禁冷冻
运输条件:4 °C 冷链运输
二、产品应用
△ 激活:在无需饲养细胞条件下,同步提供CD3第一信号与CD28第二信号,实现小鼠T细胞高效激活。
△ 扩增:支持CD4⁺与CD8⁺亚群在体外持续增殖,满足后续功能或组学实验所需细胞量。
△ 表型维持:多次刺激后仍可保留CD62L⁺、CD44⁺等关键表面标志,降低终末耗竭风险。
△ Treg诱导:提高磁珠-细胞比例至2:1并联合TGF-β,可定向诱导Foxp3⁺调节性T细胞。
三、产品优势
✅ 高比表面积:4×10⁷ beads/mL 浓度与均一 2–3 μm 粒径,保证信号强度且易与细胞在流式中区分。
✅ 无需饲养层:完全替代抗原呈递细胞,避免异源细胞污染与伦理限制。
✅ 批次稳定:抗体共价偶联工艺确保CD3/CD28密度恒定,实验重现性CV<5 %。
✅ 兼容磁分选:磁珠可被常规磁力架快速移除,支持激活后任意下游分选或功能检测。
四、使用说明(操作步骤概要)
1. 铺板:将纯化的小鼠T细胞按1×10⁵ cells/孔接种于96孔板,200 μL完全培养基。
2. 加珠:震荡混匀ActBeadsTM,按2.5 μL/孔加入,使磁珠与细胞比例≈1:1。
3. 补因子:立即添加IL-2至终浓度100 U/mL,按需联合IL-7/IL-15。
4. 培养:37 °C、5 % CO₂ 静置培养48–72 h,每日镜检细胞簇形成。
5. 换液:细胞密度>2×10⁶ cells/mL 时,补充新鲜培养基并保留磁珠。
6. 重刺激:第7–10天用磁力架移除旧磁珠,重新按1:1比例添加新鲜磁珠与IL-2。
五、注意事项
1. 防冻:严禁0 °C 以下保存,冰晶会破坏抗体构象导致信号下降。
2. 混匀:使用前需充分涡旋,防止磁珠沉降造成各孔激活强度不一。
3. 比例:Treg诱导或CD8⁺扩增需提高至2:1,常规扩增1:1即可,过高易致耗竭。
4. 换液:培养液颜色变黄前及时补液,维持pH>7.0,防止激活后凋亡增加。
六、相关产品推荐
1. 小鼠CD3 T细胞分离试剂盒(SN4101)
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4. 小鼠T淋巴细胞培养基(C400100)